[发明专利]一种新型重组免疫细胞因子及其制备方法和应用在审
申请号: | 202011591577.6 | 申请日: | 2020-12-29 |
公开(公告)号: | CN112480272A | 公开(公告)日: | 2021-03-12 |
发明(设计)人: | 崔大祥;梁辉;倪健;田静;李雪玲;沈琦 | 申请(专利权)人: | 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N15/26;C12N15/13;C12N5/0783;A61K39/395;A61K38/20;A61P37/04;A61P35/00 |
代理公司: | 上海东亚专利商标代理有限公司 31208 | 代理人: | 董梅 |
地址: | 201109 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新型 重组 免疫 细胞因子 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种重组免疫细胞因子,其特征在于,该重组免疫细胞因子同时表达IL-2和靶向PD-L1的抗体,含有IL-2和连接物的核酸编码序列如SEQ ID NO 1所示。
2.根据权利要求1所述的重组免疫细胞因子,其特征在于,所述的靶向PD-L1的抗体为PD-L1-SCFV,PD-L1-SCFV的氨基酸序列如SEQ ID NO 4所示。
3.根据权利要求1所述的重组免疫细胞因子,其特征在于,所述的IL-2的氨基酸序列如SEQ ID NO 2所示。
4.根据权利要求2所述的重组免疫细胞因子,其特征在于,PD-L1-SCFV的核酸序列如SEQ ID NO 3所示。
5.权利要求1所述的重组免疫细胞因子的制备方法,其特征在于,将表达IL-2和PD-L1-SCFV的核酸编码序列同时装入表达载体,表达靶向PD-L1单链抗体与IL-2分子融合的细胞因子。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述的制备方法包括:
(1)制备含有IL-2编码序列的核酸分子;
(2)制备含有PD-L1-SCFV编码序列的核酸分子;
(3)将步骤(1)获得的含有IL-2编码序列的核酸分子和步骤(2)获得的含有PD-L1-SCFV编码序列的核酸分子同时装入表达载体;
(4)将步骤(3)获得的重组表达载体转入宿主细胞,进行表达;
(5)分离获得表达产物,收集蛋白;
(6)筛选阳性克隆,获得靶向PD-L1的单链抗体与IL-2分子的融合细胞因子。
7.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,含有IL-2编码序列的核酸分子的序列如SEQ ID NO 1所示;含有SCFV编码序列的核酸分子的序列如SEQ ID NO 3所示。
8.权利要求1所述的重组免疫细胞因子的应用,其特征在于,所述的重组免疫细胞因子在制备治疗肿瘤的药物中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的重组免疫细胞因子表达PD-L1的单链抗体与IL-2分子融合细胞因子。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述的重组免疫细胞因子促进免疫细胞的体外增殖。
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