[发明专利]一种亲脂性荧光素探针及其制备方法

说明书

本申请涉及亲脂性荧光素探针领域，具体公开了一种亲脂性荧光素探针及其制备方法。根据本申请的亲脂性荧光素探针由以下化学式1表示，其中，R为C1～C20的亚烷基或亚环烷基；R’为C1～C20的烷基、环烷基、芳烷基、芳环烷基、烷芳基或环烷芳基。所述亲脂性荧光素探针稳定性较高，不易自水解，而在脂酶的作用下能够快速水解释放出荧光素，因此对脂酶的具有非常高亲和作用力以及非常低的检出限。此外，根据本申请的制备方法操作简单，产率高。[化学式1]

技术领域

本申请涉及亲脂性荧光素探针领域，更具体地，涉及一种亲脂性荧光素探针及其制备方法。

背景技术

荧光素，又名：荧光黄、荧光生、荧光红，英文名称：fluorescein，分子式：C₂₀H₁₂O₅，分子量：332.31，CAS号：2321-07-5。1871年，Baye在氯化锌催化下，利用间苯二酚和邻苯二甲酸缩合而首次合成得到荧光素，因其具有较高的摩尔消光系数，激发和发射波长都在可见光区，在水中具有较高的荧光量子产率，无毒，成本低等优点，因而被广泛应用在生物化学、医学和药物化学等研究中。荧光素属于呫吨染料，存在内酯型(黄色)和醌型(红色)两种异构体(如下所示)，化学名称分别为：3’,6’-二羟基螺[异苯并呋喃-1(3H),9’-(9H)-呫吨-3-酮]或9-(邻羧苯基)-6-羟基-3H-呫吨-3-酮。在其结构中，氧桥键把两个苯环固定在一个平面上，使得分子具有共平面的刚性结构，能够共轭产生离域的大π键，因而在激发光的作用下会产生强烈的荧光。

荧光素探针是一类利用荧光素及其衍生物与目标分子作用后通过荧光光谱(包括荧光强度、荧光激发与发射波长、荧光寿命和荧光偏振/各向异性等)改变来实现对目标分子进行探测的有机荧光功能染料，其具有检出限极低和灵敏度极高等优点，特别适合于对某些低含量物质，特别是生物材料进行相关的特异性检测。

然而，荧光素的分子结构中具有两个酚羟基，亲水性较强，亲脂性差，与细胞膜脂的亲和力差，难以穿过细胞膜进入细胞内部，这制约了荧光素在细胞及酶的活性分析中的应用。为了提高荧光素的亲脂性，使之易被细胞所吸收，本领域技术人员研究发现，将荧光素的两个酚羟基酯化后的衍生物显著提高了其亲脂性，容易渗透进入细胞体内，因此可用于研究细胞的特性及细胞环境。并且，虽然酯化荧光素衍生物是非荧光性的，但在进入细胞后会被脂酶水解释放出荧光素，从而使细胞产生荧光，进而通过荧光强度的检测用以分析脂酶的活性。葛凤燕(荧光素衍生物的合成及表征[D].天津大学药物科学与技术学院，2005年)报道合成了一系列碳原子个数2～18的羧酸荧光素酯类衍生物，以应用于脂酶的检测分析，从中得出荧光素酯中羧基碳链长度与其水解性能的关系，以筛选检测脂酶的性能较优的荧光素探针。但是，荧光素探针对脂酶的亲和作用力以及最低检出限仍有进一步改善的空间。

因此，本领域技术人员希望能够开发出对脂酶的亲和作用力更高以及检出限更低的亲脂性荧光素探针。

发明内容

[技术问题]

针对现有技术存在的不足，本申请的一个目的在于提供一种亲脂性荧光素探针，其不具荧光性，稳定性较高，不易自水解，而在脂酶的作用下能够快速水解释放出荧光素，因此对脂酶的具有非常高亲和作用力以及非常低的检出限，具有极大的应用前景。

本申请的一个目的在于提供一种上述亲脂性荧光素探针的制备方法，所述方法操作简单，产率高。

[技术方案]

为了实现上述目的，根据本申请的一个实施方式提供了一种亲脂性荧光素探针，其由以下化学式1表示：

[化学式1]

其中，R为C1～C20的亚烷基或亚环烷基；

R’为C1～C20的烷基、环烷基、芳烷基、芳环烷基、烷芳基或环烷芳基。