[发明专利]快速检测大肠杆菌试验方法

权利要求书

1.快速检测大肠杆菌试验方法，其特征在于：所述方法如下：

步骤一：在无菌条件下，将样本用生理盐水溶解，并将其溶解后的样品溶液通过生理盐水进行反复冲洗；

步骤二：将通过生理盐水溶解并清洗后的样本放入到高速分散机中进行分散；

步骤三：离心后的样本再用过滤膜进行多膜离心过滤，过滤后得滤液，将滤液分装至若干组无菌试管中，并在其无菌试管内加入蒸馏水进行稀释处理；

步骤四：在无菌条件下对稀释样本液进行PH值测定，得到稀释样本液的PH值，根据其PH值的数值进行酸碱调节处理；

步骤五：在无菌条件下，从通过酸碱调节处理后若干组装有稀释样本液的无菌试管内分别相应取出3份1mL的稀释液，将其取出的稀释样本液分别移至培养基上培养；

步骤六：观察所述步骤五中培养基有无气体产生，若无气体产生，则为大肠杆菌阴性，若有气体产生，则将培养基上的菌落进行革兰氏染色，同时接种在乳糖发酵管中培养，观察菌落，若乳糖发酵管中产气，革兰氏染色为阴性无芽孢杆菌，即为大肠杆菌阳性。

2.根据权利要求1所述的快速检测大肠杆菌试验方法，其特征在于：所述步骤二中高速分散机的转速为9000r/min，离心40S。

3.根据权利要求1所述的快速检测大肠杆菌试验方法，其特征在于：所述步骤四中在无菌条件下的稀释样本液PH值正常值为6.5至7.5之间，所述酸碱调节制剂分别为1mol/L的NaOH和1mol/L的HCl。

4.根据权利要求3所述的快速检测大肠杆菌试验方法，其特征在于：所述在无菌条件下的稀释样本液PH值正常值为6.5至7.5之间时，无需进行酸碱调节，当其测定的PH值低于6.5时，通过所述的酸碱调节制剂中的1mol/L的HCl进行酸性调节，当其测定的PH值高于7.5时，通过所述的酸碱调节制剂中的1mol/L的NaOH进行碱性调节，对其强酸环境进行中和处理。

5.根据权利要求1所述的快速检测大肠杆菌试验方法，其特征在于：所述步骤五中培养基的配方为乳糖、琼脂、胆盐、氯化钠、亚碲酸钾、山梨醇和肌醇，加热溶解后，加去离子水定容至1L，混匀，290℃灭菌7min，即得。

6.根据权利要求1所述的快速检测大肠杆菌试验方法，其特征在于：所述步骤一中样本与生理盐水的质量比为1:6。

7.根据权利要求1所述的快速检测大肠杆菌试验方法，其特征在于：所述步骤三中多膜离心过滤用的过滤膜为3-6层，所述过滤膜的厚度为0.3-0.4μm。