[发明专利]一种仙鹤草配方颗粒特征图谱鉴别方法

说明书

本发明公开了一种仙鹤草配方颗粒特征图谱鉴别方法，取仙鹤草配方颗粒0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入提取溶剂，称定重量，提取20‑40min，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液；另取槲皮苷、绿原酸、新绿原酸和隐绿原酸对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成溶液；十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250 mm，内径为4.6 mm，硅胶粒径为5μm；二极管阵列检测器，检测波长为250‑360nm；柱温：20℃‑40℃；流速：0.8‑1.2mL/min；甲醇‑乙腈为流动相A，以0.1%甲酸溶液为流动相B，梯度脱洗；分别精密吸取参照物溶液、供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定。

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种仙鹤草配方颗粒特征图谱鉴别方法。

背景技术

仙鹤草，为蔷薇科植物龙芽草的干燥地上部分。夏、秋二季茎叶茂盛时采割，除去杂质，干燥。本品长50～100cm，全体被白色柔毛。茎下部圆柱形，直径4～6mm，红棕色，上部方柱形，四面略凹陷，绿褐色，有纵沟和棱线，有节；体轻，质硬，易折断，断面中空。单数羽状复叶互生，暗绿包，皱缩卷曲；质脆，易碎；叶片有大小2种，相间生于叶轴上，顶端小叶较大，完整小叶片展平后呈卵形或长椭圆形，先端尖，基部楔形，边缘有锯齿；托叶，抱茎，斜卵形。总状花序细长，花萼下部呈筒状，萼筒上部有钩刺，先端裂，花瓣黄色。气微，味微苦。目前有部分文献对仙鹤草配方颗粒的成分进行含量测定研究，针对特征图谱定性研究文献较少。

发明内容

为解决前述问题，本发明提供了一种仙鹤草配方颗粒特征图谱鉴别方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种仙鹤草配方颗粒特征图谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、供试品溶液的制备：取仙鹤草配方颗粒0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入提取溶剂，称定重量，提取20-40min，放冷，再称定重量，用提取溶剂补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

(2)、参照物溶液的制备：a.取仙鹤草对照药材1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入提取溶剂，密塞，称定重量，提取20-40min，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；另取槲皮苷、绿原酸、新绿原酸和隐绿原酸对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成溶液，即得；

(3)、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为250-360nm；柱温：20℃-40℃；流速：0.8-1.2mL/min；流动相：甲醇-乙腈为流动相A，以0.1％甲酸溶液为流动相B，梯度脱洗；

(4)、测试：分别精密吸取参照物溶液、供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

优选的，步骤(1)中，所述供试品提取溶剂为甲醇或50％甲醇或70％甲醇或水或50％乙醇。

优选的，步骤(1)中，所述提取方式为回流提取或超声提取。

优选的，步骤(1)中，所述提取时间为20min或30min或40min。

优选的，步骤(2)中，所述参照物提取溶剂为50％甲醇。

优选的，步骤(2)中，取槲皮苷、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1mL含30μg的溶液，即得。

优选的，步骤(3)中，所述色谱条件如下：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为324nm，理论板数按槲皮苷峰计算应不低于5000；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；流动相：甲醇-乙腈为流动相A，以0.1％甲酸溶液为流动相B，梯度脱洗；梯度洗脱程序为：