[发明专利]一种血液中类固醇激素的纯化富集及其检测方法

权利要求书

1.一种血液样品中类固醇激素的检测方法，其特征在于，所述方法包括：

（1）用固相萃取柱富集纯化血清样品中的一种或多种类固醇激素类成分；

（2）任选地，用衍生化试剂使所述富集纯化的类固醇激素类成分衍生化；

（3）用液相色谱-串联质谱检测所述衍生化的和/或未衍生化的一种或多种类固醇激素类成分；

其中，所述固相萃取柱采用以硅胶为基质的键合填料，所述填料为键合密度为1.6-2.2μmol/m²，含碳量在10%-12%的低密度三点键合C18填料；

所述固相萃取材料的结构式如下所示：

。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述填料的硅胶颗粒度为10μm-100μm，孔径为60Å-200Å，比表面积100m²/g-600m²/g。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述固相萃取柱为30-100mg/1ml或100-500mg/5ml规格的固相萃取柱。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述类固醇激素选自雌激素、孕激素、雄激素或皮质激素的一种或多种。

5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述雌激素选自雌酮、雌二醇、雌三醇的一种或多种；所述孕激素选自孕酮、17-羟孕酮、孕烯醇酮、17-羟孕烯醇酮的一种或多种；所述雄激素选自睾酮、雄烯二酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、脱氢表雄酮硫酸酯的一种或几种；所述皮质激素选自皮质酮、皮质醇、可的松、11-脱氧皮质酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇的一种或多种。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述富集纯化方法为先采用有机溶剂：水的体积比为90:10的第一混合液活化；再加入有机溶剂：水的体积比为5:95的第二混合液平衡；然后按待测血液样品占固相萃取柱填料质量的0.5%-10%的量加入萃取柱，依次加入第一混合液和有机溶剂：水的体积比为30：70的第三混合液进行淋洗；最后用有机溶剂洗脱，收集全部的洗脱馏分。

7.根据权利要求6的检测方法，其特征在于，所述有机溶剂选自甲醇。