[发明专利]用于防治黄瓜枯萎病的芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及微生物制剂领域，具体涉及用于防治黄瓜枯萎病的芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用。所述的芽孢杆菌菌剂包括枯草芽孢杆菌ZR‑2，其保藏编号为CGMCC NO.21124；和，解淀粉芽孢杆菌ZR‑3，其保藏编号为CGMCC NO.21123。本发明中的芽孢杆菌菌剂可用于防治黄瓜枯萎病，能够防治黄瓜病害，同时，还可以促进黄瓜种子萌发和幼苗生长，有利于黄瓜增产增收。

技术领域

本发明涉及微生物制剂领域，具体涉及用于防治黄瓜枯萎病的芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

黄瓜枯萎病是黄瓜生产上的重要病害之一，是典型的土传病害，全国各地均有发生，吉林、辽宁、山东、湖北、北京等省市发生尤为严重，发病率一般在10％～30％，严重时可达80％～90％，是制约黄瓜产量和品质的重要因素。近年来，随着张家口地区大棚蔬菜的迅速发展，复种指数增加，黄瓜枯萎病发生越发严重，给黄瓜生产造成极大的损失。黄瓜枯萎病菌从植株根部的伤口或根尖侵入，在维管束内生长发育，堵塞导管，阻碍水分和无机盐的运输，分泌毒素引起植株萎蔫死亡，病情发展迅速，而且呈逐年加重趋势，化学防治会形成二次污染，会对人身体健康造成不良影响，因此筛选生防菌剂对有效防控黄瓜枯萎病具有重要意义。

CN 104560837A中提到了一种解淀粉芽孢杆菌，并提到其可与其他具有抑菌作用的芽孢杆菌、霉菌等组合成复合微生物制剂，对白粉病、灰霉病、褐斑病、果腐病等植物病害的防治效率达到85％-90％。但其并未提供对黄瓜枯萎病的防治试验及效果数据，而黄瓜枯萎病与其所验证的植物病害的致病机理存在实质差异。而CN 101531971A中提到了一种枯草芽孢杆菌M-2菌株，其是分离于海洋红树植物的根际促生菌，能够抑制黄瓜枯萎病病菌、番茄根腐病病菌、大豆根腐病病菌等多种有害真菌的生长。但其并未提到对黄瓜种子萌发和幼苗生长的作用，尤其是并未提到对黄瓜种子萌发所具有的作用。

发明内容

针对上述不足，本发明从305个不同属、种中筛选出最佳稳定共生菌种组合，通过单独培养筛选高产菌种，最终筛选出的菌种为枯草芽孢杆菌ZR-2(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌ZR-3(Bacillus amyloliquefaciens)。并基于上述发现，提供了用于防治黄瓜枯萎病的芽孢杆菌菌剂及其制备方法和应用。

具体而言，本发明首先提供枯草芽孢杆菌ZR-2，其保藏编号为CGMCC NO.21124，分类命名为：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)，保藏时间是2020年11月06日。同时提供解淀粉芽孢杆菌ZR-3，其保藏编号为CGMCC NO.21123，分类命名为：解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，保藏时间是2020年11月06日。两株菌株的保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；邮编为100101。

本发明进一步提供一种芽孢杆菌菌剂，包括：

枯草芽孢杆菌ZR-2，其保藏编号为CGMCC NO.21124；和，

解淀粉芽孢杆菌ZR-3，其保藏编号为CGMCC NO.21123。

为了更有利于二者的协同效果，作为优选，所述芽孢杆菌菌剂包括：

枯草芽孢杆菌ZR-2 1.5×10⁸-2.0×10¹⁰cfu/mL；

解淀粉芽孢杆菌ZR-3 3.5×10⁸-2.0×10¹⁰cfu/mL；

总菌数为2×10¹⁰-4×10¹⁰cfu/mL。

更优选地，所述芽孢杆菌菌剂由如下组分组成：

枯草芽孢杆菌ZR-2 7.5×10⁹-1.0×10¹⁰cfu/mL；