[发明专利]一种厄贝沙坦中潜在基因毒性杂质的液相色谱-质谱联用检验方法

权利要求书

1.一种厄贝沙坦中杂质1的液相色谱-质谱联用检测方法，其中杂质1的结构式如下：

所述方法包括：

1)色谱条件

2)质谱条件

离子源类型：电喷雾电离

质谱时间段设置：

MRM方法：

3)溶液配制

流动相

流动相A：0.1％甲酸水溶液，

流动相B：乙腈，

稀释液：乙腈-水，乙腈与水的体积比为80:20，

洗针液：甲醇，

空白溶液：稀释液

杂质1对照品贮备溶液：采用杂质1对照品和稀释液配制杂质1对照品贮备溶液，杂质1对照品贮备溶液中杂质1浓度为148ng/ml～153ng/ml，

对照品溶液：采用杂质1对照品贮备溶液和稀释液配制对照品溶液，对照品溶液中杂质1浓度为14.8ng/ml～15.3ng/ml，

灵敏度溶液：采用对照品溶液和稀释液配制灵敏度溶液，灵敏度溶液中杂质1的浓度为1.18ng/ml～1.23ng/ml，

供试品溶液：采用厄贝沙坦供试品和稀释液配制供试品溶液，供试品溶液中厄贝沙坦的浓度为2.9mg/ml～3.2mg/ml，

4)测定方法

分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录LC-MSMS谱图；

计算公式

杂质1含量(ppm)＝(Cs/CT)×(rT/rs)

式中：

Cs为对照品溶液中杂质1的浓度，ng/ml；

CT为供试品溶液的浓度，mg/ml；

rT为供试品溶液中杂质1的峰面积；

rs为对照品溶液6次进样中杂质1的平均峰面积。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述测定方法为：

1)待系统稳定后，注入空白溶液，无干扰后再注入灵敏度溶液和对照品溶液，灵敏度溶液中杂质1的信噪比不得小于10，对照品溶液中重复进样的杂质1的峰面积RSD不大于15％，记录数据和LC-MSMS谱图；

2)系统适用性符合要求后注入空白溶液，空白溶液无干扰后再注入供试品溶液，序列最后追加对照品溶液，追加的对照品溶液与步骤1)进样对照品溶液中杂质1峰面积RSD不大于15％，记录数据和LC-MSMS谱图。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，厄贝沙坦中检测杂质1的检测限是0.13ppm，定量限是0.41ppm。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，质谱采集MRM方法中，杂质1的驻留时间是180毫秒。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在检测之前的方法验证，该方法验证按照正式检测的色谱条件，验证项目如下：

(1)专属性

测定方法：分别将空白溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；

(2)定量限和检测限

测定方法：分别将空白溶液、对照品溶液、检测限测试溶液、定量限测试溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；

(3)线性与范围

测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、线性测试溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；

(4)溶液稳定性

测定方法：将对照品溶液和供试品溶液在室温下放置0天-2天后，分别注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；

(5)精密度

测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；

(6)准确度

测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图；

(7)耐用性

测定方法：分别将空白溶液、灵敏度溶液、对照品溶液、供试品溶液注入液相色谱质谱联用仪，记录色谱图。