[发明专利]一种用于稳定核酸分子的试剂组合物及其应用

权利要求书

1.一种用于稳定化生物学样品中的核酸分子的试剂组合物，其特征在于，所述试剂组合物包含pH稳定剂、螯合剂、蛋白变性剂和抗微生物剂和水。

2.根据权利要求1所述的试剂组合物，其特征在于：

所述试剂组合物还包含无机盐离子和还原剂。

3.根据权利要求1或2所述的试剂组合物，其特征在于：

所述试剂组合物进一步包含组织渗透剂和核酸酶抑制剂。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的试剂组合物，其特征在于：

所述pH稳定剂选自由三羟基氨基甲烷、乙酸钠、柠檬酸、邻苯二甲酸氢钾、硼酸、磷酸二氢钾、碳酸二氢钠、碳酸钠、二乙醇胺、丙磺酸、柠檬酸钠、磷酸二氢钠、醋酸钠、甘氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、乙酸铵、亮氨酸、乙磺酸、半胱氨酸和四硼酸钠组成的组中的一种或多种；

优选的是，所述pH稳定剂包含至少两种缓冲物质；更优选的是，所述至少两种缓冲物质选自由如下组合：(i)三羟基氨基甲烷和柠檬酸的组合，(ii)碳酸钠和甘氨酸组合，(iii)二乙醇胺和丙磺酸组合，(iv)乙酸钠、柠檬酸钠和丙氨酸的组合；更优选的是，所述pH稳定剂为乙酸钠、柠檬酸钠和丙氨酸的组合；进一步优选的是，所述试剂组合物包含10-500mM乙酸钠，1-200mM柠檬酸钠和50-300mM丙氨酸作为pH稳定剂；更优选的是，所述试剂组合物包含100mM乙酸钠、100mM柠檬酸钠和50mM丙氨酸作为pH稳定剂。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂盒，其特征在于：

所述螯合剂选自由N-乙酰-L-半胱氨酸、EDTA(乙二胺四乙酸)、水杨酸、三草酸、DTPA(二亚乙基三胺五乙酸)、柠檬酸、邻菲咯啉、酒石酸钾钠、柠檬酸铵、酒石酸和三乙醇胺等组成的组中的一种或多种组成的组中的一种或多种；优选的是，所述螯合剂选自由EDTA、三草酸、酒石酸钾钠、酒石酸和/或柠檬酸钠组成的组中的一种多种；更优选的是，所述螯合剂选自由EDTA、三草酸、酒石酸和/或柠檬酸钠组成的组中的一种或多种；

优选的是，所述试剂组合物包含10mM至200mM的螯合剂。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的试剂组合物，其特征在于：

所述蛋白变性剂选自由盐酸胍、硫氰酸钾、异硫氰酸胍、硫氰酸钠、硫氰酸钾、碘化钠、高氯酸钠、尿素、去污剂组成的组中的一种或多种；优选的是，所述蛋白变性剂包含第一蛋白变性剂和第二蛋白变性剂，其中，所述第一蛋白变性剂的蛋白变性能力高于所述第二蛋白变性能力；更优选的是，所述第一蛋白变性剂选为十二烷基硫酸钠且所述第二蛋白变性剂为辛烷基聚氧乙烯基十二烷基氯化铵，或者所述第一蛋白变性剂选为异硫氰酸胍且所述第二蛋白变性剂为Brij 58，所述第一蛋白变性剂选为尿素且所述第二蛋白变性剂为聚乙二醇辛基苯基醚；优选的是，所述第二蛋白变性剂在所述试剂组合物的浓度为0.05％(w/v)至0.5％(w/v)、2％(w/v)至20％(w/v)、或2.5％(w/v)至10％(w/v)；另外优选的是，所述蛋白变性剂为十二烷基硫酸钠且在所述试剂组合物中的浓度为0.2％(w/v)至2.5％(w/v)，或者所述第一蛋白变性剂为尿素、或异硫酸氰胍且在所述试剂组合物中的浓度为1M至5M。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的试剂组合物，其特征在于：

所述抗微生物剂选青霉素、链霉素、庆大霉素、三氯生、Irgasan、IRGASAN DP 300、Proclin 950、Proclin 300、Proclin 150、叠代钠、碳酸锂，氯化锂、酰基苯胺类、咪唑类、噻唑类、异噻唑酮衍生物、醇类抗微生物剂组成的组中的一种或多种；

优选的是，所述醇类抗微生物剂为乙醇、异丙醇、甘油、聚乙二醇、甲醇等单元醇或者是多元醇；

另外优选的是，所述抗微生物剂为乙醇、异丙醇、氯化锂、聚乙二醇、庆大霉素、三氯生或其组合；

更为优选的，所述试剂组合物包含浓度5-15％的乙醇或浓度0.05％的庆大霉素作为抗微生物剂。