[发明专利]一种用于稳定核酸分子的试剂组合物及其应用在审
申请号: | 202011599233.X | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN112760318A | 公开(公告)日: | 2021-05-07 |
发明(设计)人: | 张佳斌;何宗顺;邹永龙;曲峰 | 申请(专利权)人: | 苏州白垩纪生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 北京格允知识产权代理有限公司 11609 | 代理人: | 谭辉 |
地址: | 215002 江苏省苏州市苏州工*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 稳定 核酸 分子 试剂 组合 及其 应用 | ||
本发明提供了一种用于稳定化生物学样品中的核酸分子的试剂组合物,该试剂组合物包含pH稳定剂、螯合剂、蛋白变性剂和抗微生物剂和可选的如无机盐离子、组织渗透剂、还原剂、核酸酶抑制剂等。本发明还提供了使用所述试剂组合物来运输、保存和稳定化生物学样品中的核酸分子的方法以及所述试剂组合物在运输、保存和稳定化生物学样品中的核酸分子中的应用。本发明确保用于生物样品中高分子量DNA的常温长期保持。
技术领域
本发明涉及用于稳定生物学样品中的核酸分子的技术领域。更具体地说,本发明涉及用于稳定生物样品存在的核酸分子的试剂组合物及其应用。
背景技术
在诊断学领域中,核酸是重要的生物标志物。例如,包含人类基因组中的基因或其片段在分子体外诊断学中被广泛用作生物标志物,以为正常的生物和病理过程提供见解,并预测疾病结果和指导精准用药。因此,核酸分子在疾病诊断、预后和用于生物标志物发现的临床试验中是重要的。基因组学是探索基础生物学、诊断疾病、促进药物开发、为特定病理和遗传情况定制疗法以及产生与生物或治疗过程和途径相关的数据库的强有力工具。然而,已经发现生物样品中核酸如果没有得到妥善保存和稳定化将可能会损害后续分析的结果,如果在待分析的样品的保存和稳定化中不采取预防措施,样品将在运输和储存期间经历可能严重改变被靶向分子的情况。
我们应当理解,用于运输保存和稳定核酸的结构和功能完整性的方法对于广泛多种应用是重要的,所述应用包括诊断应用、治疗应用、预后应用、研究应用、法医应用、测序应用、扩增应用、分析物检测、传感应用等。各种条件如pH、温度、湿度、运输、氧化、还原、盐离子等都会导致核酸的降解。因此,需要一种用于运输、保存和稳定生物样品中核酸分子的试剂和方法。
发明内容
本发明是基于以下发现:在包含有核酸的生物样品中,有的核酸以游离的形成存在,如血浆中的游离DNA,有些在固体中如动植物组织中的基因组DNA、骨骼中基因组DNA、粪便中破碎细胞的基因组DNA,以及包含在含有细胞的生物样品中的核酸。这些含有细胞的生物样品可以是全血、培养细胞、组织、粪便、土壤、唾液、痰液、肺泡灌洗液、脑脊液等。本发明人经过研究发现,某些试剂的组合能够令人吃惊地有效稳定这些生物样品中的DNA,可以使核酸分子DNA高度稳定,不会使其片段化,同时还可以允许在室温下对DNA进行运输或保存。
于是,本发明通过用这些试剂组合添加到样品中进行分散后,可以使生物样品中的核酸瞬间稳定化,从而应用于它们的运输和长时间保存,以便用于后续基于DNA的分析。本发明通过这些试剂组合可以快速抑制DNA酶活性,杀灭病原体微生物,阻止细胞活性来保护DNA的稳定性。
于是,本发明在第一方面提供了一种试剂组合物,所述试剂组合物为包含用于稳定一种或多种生物样品中的核酸分子的试剂组合物,在该试剂组合物中含有多种组分。
在一些实施例中,生物样品可以是细胞、或含有细胞的拭子样品。
在其他一些实施方式中,生物样品可以是体液样品,如血液、血清、血浆、痰、粘液、脑脊液、尿液、精液或其组合。
在另外一些实施例中,生物样品可以是固体类型样品,如粪便、土壤、动物组织和植物组织。
本发明的试剂组合可以包含pH稳定剂、螯合剂、蛋白变性剂、抗微生物剂和水。
进一步,所述试剂组合物还可以包含无机盐离子和还原剂。
进一步,所述试剂组合物还可以包含组织渗透剂和核酸酶抑制剂。
下文将对本发明的试剂组合物的组分进行说明,如果没有特别说明,列出的这些组分的具体选择进出举例目的而非限制目的。对于没有列出具体选择的组分,可以采用本技术领域常用的已知组分。
应当理解的是,下文列举的各组分如果没有特别说明的话,都只是出于举例目的而非限制目的。
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