[发明专利]一种提取高山被孢霉所含油脂的方法

权利要求书

1.一种提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）将产油微生物高山被孢霉菌种接种到液体培养基中发酵，得到微生物发酵液；

（2）将步骤（1）得到的微生物发酵液进行过滤，得到高山被孢霉湿细胞；再将高山被孢霉湿细胞溶于重量百分比浓度为3~5%的氯化钠溶液中，得到高山被孢霉细胞溶液，高山被孢霉细胞溶液中高山被孢霉细胞的重量百分比浓度按干物质计为10~20%；然后对高山被孢霉细胞溶液进行乳化剪切，调节高山被孢霉细胞溶液的温度至40~60℃；

（3）将步骤（2）得到的高山被孢霉细胞溶液的pH值调节至6.5~7.5，再向高山被孢霉细胞溶液中加入自溶诱导剂，自溶诱导剂的添加量为高山被孢霉细胞干物质重量的1.5~2.5%；然后持续进行搅拌，在真空无氧环境中使高山被孢霉细胞自溶8~12小时，得到高山被孢霉自溶液；

（4）采用离心机对高山被孢霉自溶液进行离心分离，收集上层油脂；

（5）收集步骤（4）离心分离得到的下层固体，再将该下层固体与80~90℃的纯化水混合均匀，经过离心机离心分离并收集上层油脂；

（6）将步骤（4）收集的上层油脂与步骤（5）收集的上层油脂混合，得到所需的油脂。

2.根据权利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（2）中，将步骤（1）得到的微生物发酵液进行板框过滤，得到高山被孢霉湿细胞。

3.根据权利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（2）中，采用高剪切乳化机，在转子转速为8000-12000转/分钟的情况下对高山被孢霉细胞溶液乳化剪切5-15分钟。

4.根据权利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（3）中所用的自溶诱导剂是几丁质酶、纤维素酶、β葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶中的一种或其中多种的组合。

5.根据权利要求4所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（3）中所用的自溶诱导剂由几丁质酶、纤维素酶、β葡聚糖酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，其重量比例为几丁质酶∶纤维素酶∶β葡聚糖酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶=（1-3）∶（1-3）∶（1-3）∶（1-3）∶（1-3）。

6.根据权利要求4所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（3）中所用的自溶诱导剂由几丁质酶、纤维素酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶组成，其重量比例为几丁质酶∶纤维素酶∶木瓜蛋白酶∶中性蛋白酶=（1-3）∶（1-3）∶（1-3）∶（1-3）。

7.根据权利要求4所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（3）中所用的自溶诱导剂由几丁质酶、纤维素酶和中性蛋白酶组成，其重量比例为几丁质酶∶纤维素酶∶中性蛋白酶=1∶（1-3）∶（1-3）。

8.根据权利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（3）自溶过程中全程监控pH值，使用磷酸与氨水调节pH值在6.5~7.5的范围内。

9.根据权利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（4）中，采用离心机，在转子转速为10000-15000转/分钟的情况下对高山被孢霉细胞溶液离心5-15分钟。

10.根据权利要求1所述的提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征是：步骤（5）中，采用离心机，在转子转速为10000-15000转/分钟的情况下对下层固体与纯化水的混合液离心5-15分钟。