[发明专利]一种提取高山被孢霉所含油脂的方法

说明书

一种提取高山被孢霉所含油脂的方法，包括以下步骤：（1）将高山被孢霉菌种接种到液体培养基中发酵，得到发酵液；（2）过滤得到高山被孢霉湿细胞并溶于氯化钠溶液中，得到高山被孢霉细胞溶液，然后进行乳化剪切，调节温度至40~60℃；（3）调节高山被孢霉细胞溶液的pH值至6.5~7.5，加入自溶诱导剂，再持续进行搅拌，在真空无氧环境中使高山被孢霉细胞自溶8~12小时，得到高山被孢霉自溶液；（4）进行离心分离，收集上层油脂；（5）收集步骤（4）离心分离得到的下层固体并与纯化水混合均匀，离心分离并收集上层油脂；（6）将步骤（4）和（5）收集的上层油脂混合。本发明能有效提取出高山被孢霉细胞内的油脂，工艺简单，低能耗，有利于实现规模化生产。

技术领域

本发明涉及油脂提取方法，具体涉及一种提取高山被孢霉所含油脂的方法。

背景技术

多不饱和脂肪酸（PUFAs）对人体的生长发育及身体健康起着至关重要的作用。人体维持各种组织的正常功能，必须保证有充足的各种脂肪酸，如果缺乏，则会引发一系列症状，包括生长发育迟缓、皮肤异常鳞屑、智力障碍等。例如花生四烯酸（ARA）作为一种重要的PUFAs，在婴幼儿增强记忆、思维能力保护视力，提高智力等方面具有非常显著的作用。当婴儿膳食中长期缺乏ARA时，会导致婴幼儿患迟发型的败血症。

在ARA油脂制造行业，有机溶剂经常作为萃取剂被使用，后续一般是通过真空干燥把有机溶剂从产品中蒸发出来。如果真空干燥温度、真空度和时间控制不恰当，那么有机溶剂在产品中的残留量在一定程度上会增加，从而进入后续的生产过程中，最终被消费者食用。有机溶剂最大的特点就是易挥发，继而通过呼吸道进入人的体内，从而损害中枢神经和呼吸道，甚至内脏器官。因此，若有可能，应减少使用有机溶剂，以减少看不见的危害进入食品链的可能。

花生四烯酸（ARA）主要来源于鱼油、动物肝脏提取油脂和微生物发酵提取，其中利用高山被孢霉发酵提取ARA被广泛采用。高山被孢霉来源的ARA油脂EPA含量低，异养发酵可以制备不含或者含很少量重金属和有机污染物的ARA油脂。

高山被孢霉提取ARA油脂的特殊之处在于，细胞破壁后油脂无法直接游离于发酵液中，油脂会与细胞壁的糖类、蛋白质结合，这是业界一直困扰的问题、也是阻挠高山被孢霉非溶剂法提取ARA油脂的关键因素。高山被孢霉提取ARA油脂若使用碱酶法破壁提油，油脂游离到发酵液中容易与碱发生皂化反应，降低了提油得率。

目前使用微生物发酵生产ARA油脂的技术已经非常成熟，但是在微生物发酵生产ARA油脂的提取工艺上仍存在上述一些问题，需要进行改进。CN101195813A的专利申请公开了一种使用高压均质破碎细胞壁提取油脂的工艺， 该工艺需要使用到120MPa的高压多次对微生物细胞进行破碎，生产所需要的能耗巨大，不利于实现大规模生产。CN 101985637B的专利申请公开了一种使用微生物自溶提取微生物油脂的方法，该工艺需要使用到6号抽提溶剂、己烷、庚烷或石油醚，这为企业生产带来了不稳定的风险，也为有机溶剂残留危害进入食品链提供了可能。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种提取高山被孢霉所含油脂的方法，该提取方法能有效提取出高山被孢霉细胞内的油脂（如ARA油脂），工艺简单，低能耗，有利于实现规模化生产。采用的技术方案如下：

一种提取高山被孢霉所含油脂的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）将产油微生物高山被孢霉菌种接种到液体培养基中发酵，得到微生物发酵液；

（2）将步骤（1）得到的微生物发酵液进行过滤，得到高山被孢霉湿细胞；再将高山被孢霉湿细胞溶于重量百分比浓度为3~5%的氯化钠溶液中，得到高山被孢霉细胞溶液，高山被孢霉细胞溶液中高山被孢霉细胞的重量百分比浓度按干物质计为10~20%；然后对高山被孢霉细胞溶液进行乳化剪切，调节高山被孢霉细胞溶液的温度至40~60℃；