[发明专利]一种烟草特有N-亚硝胺标准物质的制备方法

说明书

本发明提供一种烟草特有N‑亚硝胺标准物质的制备方法及其制备的烟草特有N‑亚硝胺标准物质。所述烟草特有N‑亚硝胺选自N‑亚硝基降烟碱、4‑(甲基亚硝基)‑1‑(3‑吡啶基)‑1‑丁酮、N‑亚硝基降新烟草碱和N‑亚硝基假木贼碱中的至少一种。所述制备方法包括如下步骤：1.候选物的检测，2.溶剂验证，3.烟草特有N‑亚硝胺标准物质的配制和分装，4.烟草特有N‑亚硝胺标准物质的检验，5.标准物质中各组分的定值，6.标准物质中各组分含量定值结果的不确定度评定。

技术领域

本发明属于分析化学技术领域，具体涉及一种烟草特有N-亚硝胺标准物质的制备方法，该方法制备的烟草特有N-亚硝胺标准物质及其应用。

背景技术

烟草特有N-亚硝胺(tobacco-specific N-nitrosamines,TSNAs)是一类广泛存在于烟草和卷烟烟气中的致癌物，可能是烟草生物碱在微生物的作用下发生亚硝化作用而生成，或者可能是硝酸盐在微生物的作用下生成亚硝酸盐，这些亚硝酸盐和其他氮氧化物再与烟草生物碱反应生成TSNAs。目前已经鉴别出的TSNAs有8种，其中普遍受到关注的有N-亚硝基降烟碱(NNN)、4-(甲基亚硝基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)、N-亚硝基降新烟草碱(NAT)和N-亚硝基假木贼碱(NAB)等4种。N-亚硝基降烟碱(NNN)和4-(甲基亚硝基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)已被证明具有明确的哺乳动物致癌性。流行病学调查表明，人类是TSNAs化合物引起癌症的易感群体。因此现有技术中已经出现了多种烟草和烟气中TSNAs的测定方法，如紫外-可见分光光度法(UV-Vis)、薄层色谱法(TLC)、毛细管电泳法(CE)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)和高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)；其中液相色谱-串联质谱法最为常用，也是ISO标准中规定的分析方法。无论采用哪种测定方法，除测试环境条件、设备状态和操作人员的熟练程度外，标准溶液的配制是引起结果偏差的重要因素。

目前，在国际标准物质数据库(International Data Bank on CertifiedReference Materials,COMAR,https://www.comar.bam.de/home/login.php)和国家标准物质资源共享平台(https://www.ncrm.org.cn/)上都没有TSNAs标准物质登记。国内各级烟草质量监督检验部门和中烟技术中心在测定TSNAs时，主要采用试剂公司提供的分析标准品配制工作曲线。商品化分析标准品解决了标准品的获取难题，但是不同试剂提供厂家的产品纯度差异及检验员称量时的操作误差都会严重影响最终检测结果的一致性。更重要的是，目前的分析标准品没有对TSNAs进行标准定值和不确定度评定，无法保证测试时的量值溯源，不能用于标准方法和设备的校准评价、分析系统之间的差异分析，严重影响了日常检测和分析工作。

因此，为了更方便地对烟草及卷烟制品进行TSNAs含量测定，同时保证分析数据的量值溯源和可对比性，有必要开发出一种烟草特有N-亚硝胺标准物质的制备方法，并由此制备得到一种烟草特有N-亚硝胺标准物质。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供一种烟草特有N-亚硝胺标准物质的制备方法，通过该方法制备的烟草特有N-亚硝胺标准物质。

为此，本发明采用了如下的技术方案：

一种烟草特有N-亚硝胺标准物质的制备方法，所述烟草特有N-亚硝胺选自N-亚硝基降烟碱(NNN)、4-(甲基亚硝基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)、N-亚硝基降新烟草碱(NAT)和N-亚硝基假木贼碱(NAB)中的至少一种；所述制备方法包括如下步骤：

1.候选物的检测

1-1.候选物结构验证

测定所述候选物的红外光谱、紫外光谱、质谱、核磁共振碳谱和核磁共振氢谱，根据图谱信息验证候选物的结构；如通过验证，则进行以下各步；