[发明专利]Abcg4基因在构建肥胖程度呈双向变化动物模型中的用途

说明书

本发明属于动物基因工程和遗传修饰领域，具体地说，涉及Abcg4基因在构建肥胖程度呈双向变化动物模型中的用途。所述用途具体是指通过敲除动物体内Abcg4基因，或抑制Abcg4基因的表达，来构建动物模型。所述动物模型的肥胖程度依赖于性别，表现为以同窝生同性别野生型为参照，雌性变胖且血液甘油三酯含量降低，雄性变瘦且血液甘油三酯含量升高。本发明的模型可用于研究肥胖症及相关疾病，并可用于筛选出更加有效、更有针对性的靶向治疗肥胖或治疗血浆甘油三酯升高的药物。

技术领域

本发明属于动物基因工程和遗传修饰领域，具体的说，涉及Abcg4基因在构建肥胖程度呈双向变化动物模型中的用途。

背景技术

糖和脂质是人体必需的营养物质，它们既为细胞提供能量同时也是细胞的基本结构成分。糖脂代谢在健康的个体中能被精准地调节，糖脂代谢异常则会引起包括肥胖症、脂肪肝、糖尿病、动脉粥样硬化、心脑血管疾病，甚至癌症等许多疾病。因此，糖脂代谢稳态平衡对机体的健康起着重要的作用。

肥胖是由身体的脂肪过量累积所产生的一种复杂的疾病，而肥胖基因，是指基因所编码蛋白质是一种食欲与能量平衡调节途径的组成部分，这种途径的失衡直接或者间接导致体脂肪的积累和体重增加。肥胖不仅仅影响人体的美观，更可以增加其它疾病和健康问题的患病风险。在北美洲，三分之二的美国成年人被归为超重或肥胖。

肥胖受遗传因素即基因的影响，近年来，大规模的基因组关联研究(GWASs,genome-wide association studies)方法应用于肥胖相关基因的鉴定，但一般找出的基因数量比较多，单个基因分析时其对肥胖的影响并不大，不同实验室的结果也不尽一致，能相互验证的例子较少。比如Fall T等运用GWAS和荟萃分析(meta-analyses)发现有超过75个基因位点与肥胖相关。最近，另有研究报道，通过全基因组关联分析发现了500多个与肥胖特征相关的基因位点，但每一个位点内精确定位致病基因仍很困难。

疾病动物模型可以为了解疾病发生发展机制，发展疾病预防和干预方法提供巨大帮助。作为哺乳动物，小鼠遗传操作和表型分析技术最为成熟，在各种疾病动物模型培育研究中占主导地位。但长期以来所使用的肥胖动物模型在不同的性别间其肥胖程度没有差异，且至今尚无不同性别间肥胖程度呈双向变化的动物模型的相关报道。

发明内容

为了克服现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供Abcg4基因在构建肥胖程度呈双向变化动物模型中的用途。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个方面，提供Abcg4基因在构建肥胖程度呈双向变化动物模型中的用途。

进一步的，所述用途具体是指通过敲除动物体内Abcg4基因或抑制Abcg4基因的表达，来构建动物模型。

更进一步的，所述动物模型的肥胖程度依赖于性别，表现为以同窝生同性别野生型为参照，雌性变胖且血液甘油三酯含量降低，雄性变瘦且血液甘油三酯含量升高。

更进一步的，所述动物为哺乳动物。

更进一步的，所述哺乳动物为小鼠。

更进一步的，敲除小鼠Abcg4基因的方法包括如下步骤：

S1、以野生型小鼠基因组为模板，以引物对I扩增包含Abcg4基因第6外显子至部分第7外显子的片段，记作片段I；

所述引物对I的核苷酸序列为：

FI:5’-TGGTGGATGGTGCAGATGAC-3’；

RI:5’-AAATCGGGGTGGTGCTTAGG3’；

以引物对II扩增包含Abcg4基因第9-14外显子的片段，记作片段II；

所述引物对II的核苷酸序列为：