[发明专利]一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法

权利要求书

1.一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)采用乙腈和水体积比9:1的溶液提取待测样品中的苦参碱，得到的提取液经强阳离子交换萃取柱净化提取复溶得到样品溶液，具体步骤如下：准确称取待测样品20g，置于离心管中，准确加入乙腈和水体积比9:1的溶液50mL，设置250-400次/min的频率剧烈振摇10-15min，静置后放入离心机，3000r/min离心5min取上清液，残渣继续用25mL乙腈和水体积比9:1的溶液提取，合并滤液于100mL容量瓶，加入1.0mol/L盐酸4mL，用乙腈和水体积比9:1的溶液定容，取出5mL滤液待净化；用5％氨化甲醇溶液活化强阳离子交换萃取柱，依次用甲醇和水预淋洗，5mL滤液全部过柱后，依次用水和甲醇淋洗强阳离子交换萃取柱，抽干；用5％氨化甲醇溶液洗脱萃取柱两次，洗脱液在40℃下氮气吹干，加入1.00mL流动相，涡旋30s，过0.22μm有机系滤膜供仪器测定；

(2)配制苦参碱的标准溶液，按照浓度梯度配制多份标准系列溶液；

(3)采用高效液相色谱法对所述样品溶液和标准品溶液进行检测分析，利用外标法得到苦参碱的含量。

2.根据权利要求1所述一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)采用乙腈和水体积比9:1的溶液提取待测样品中的苦参碱，得到的提取液经强阳离子交换萃取柱净化提取复溶得到样品溶液；具体步骤如下：准确称取待测样品20g，置于离心管中，准确加入乙腈和水体积比9:1的溶液50mL，设置300次/min的频率剧烈振摇12min，静置后放入离心机，3000r/min离心5min取上清液后，残渣继续用25mL乙腈和水体积比9:1的溶液提取，合并滤液于100mL容量瓶，加入1.0mol/L盐酸4mL，用乙腈和水体积比9:1的溶液定容，取出5mL滤液待净化；用5％氨化甲醇溶液活化强阳离子交换萃取柱，依次用甲醇和水预淋洗，5mL滤液全部过柱后，依次用水和甲醇淋洗强阳离子交换萃取柱，抽干；用5％氨化甲醇溶液洗脱萃取柱两次，洗脱液在40℃下氮气吹干，加入1.00mL流动相，涡旋30s，过0.22μm有机系滤膜供仪器测定。

(2)配制苦参碱的标准溶液，按照浓度梯度配制多份标准系列溶液；

(3)采用高效液相色谱法对所述样品溶液和标准品溶液进行检测分析，利用外标法得到苦参碱的含量。

3.根据权利要求1或2所述一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，其特征在于，标准系列溶液的配制包括如下步骤：

精密称取适量苦参碱标准品，用甲醇溶解稀释并转移至容量瓶并定容，配制成适当浓度的苦参碱标准储备液，分别吸取适量储备液，用流动相配制成浓度0.1ug/ml，0.3ug/ml，0.5ug/ml，1.0ug/ml，5.0ug/ml，10.0ug/ml系列标准工作液。

4.根据权利要求1或2所述一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，高效液相色谱检测分析包括如下步骤：将标准工作液与样品工作液分别注入到高效液相色谱仪中，进行高效液相色谱分析，以标准工作液的峰面积与样品工作液峰面积进行定量比较，保留时间定性，外标法进行计算，计算样品中苦参碱的含量；其特征在于，所述高效液相色谱法的色谱条件为：

色谱柱：C18色谱柱，规格为柱长150mm，内径4.6mm，粒径5μm；柱温：30±5℃；

进样量：10μL；流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为甲醇，所述流动相B为pH＝9，5％磷酸氢二钠水溶液，二者体积比为A:B＝40:60；流速：1.0mL/min；检测波长：波长设置为215nm。