[发明专利]一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法

说明书

本发明涉及一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，包括如下步骤：(1)采用乙腈水溶液提取待测样品中的苦参碱，得到的提取液经强阳离子交换萃取柱净化提取复溶得到样品溶液；(2)配制苦参碱的标准溶液，按照浓度梯度配制多份标准系列溶液；(3)采用高效液相色谱法对所述样品溶液和标准品溶液进行检测分析，利用外标法得到苦参碱的含量。本发明的有益效果是：能够更有针对性，更快速有效地对果蔬中苦参碱农药残留量进行准确的分析检测，使得成分检测分析更快速。获得的苦参碱的峰形和分离度都很好，且线性很好，可以有效和基质中其他杂质获得有效分离，检测提取更为精确。过程简单，提取效率高，净化效果好，检测精度高，检测灵敏。

技术领域

本发明属于食品污染物检测技术领域，特别涉及一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法。

背景技术

苦参碱是豆科植物苦参的干燥根、植株、果实经乙醇等有机溶剂提取制成，是一种生物碱，在农业上是低毒、环保型农药，具有杀虫、杀菌活性和调节植物生长等多种功能对病虫害的防治和植物生长调节有较好作用，因此其作为一种新兴植物源性农药的有效成分被广泛应用于作物的种植栽培过程中。农药不仅会附着在农作物上，还会进入土壤、大气和水体中，而灌溉和降水又将土壤和大气中的残留药物带入水体中容易被动植物富集，并可通过食物链的传递危及人类健康。苦参碱用于水果、蔬菜病害的防治效果良好，但至今GB2763-2019《食品安全国家标准食品中农药最大残留限量》中目前尚无苦参碱在水果蔬菜中的检测方法标准，文献中大多是针对中药、烟草的检测，没有涉及果蔬产品。但苦参碱超范围使用、超限量添加现象却存在。发达国家已通过农药限量对中国的蔬菜、水果和水产品实施贸易技术壁垒。目前国际上适用用苦参碱的检测主要是液相色谱串联质谱、气相色谱串联质谱苦参碱的残留量，检测方法中前处理步骤比较繁琐，检验耗时较长，且需要购买价格昂贵的设备，所消耗的试剂量也较大。除此之外果蔬产品含有较多色素和有机酸，会对目标峰的确认有不同程度的干扰，需采用固相萃取方式对样品提取净化，减少干扰。

因此，建立固相萃取-高效液相色谱法快速测定果蔬中苦参碱含量的检测方法，可利于对果蔬中苦参碱大批量检测的操作，大大改善了样品的分析效率，降低了检测难度，提高样品检测的准确性，更好的对果蔬质量安全有效监督。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，不但降低成本还减少干扰，保证检测准确度，具体方法如下：

一种果蔬中苦参碱农药残留量的高效液相色谱检测方法，包括如下步骤：采用乙腈和水体积比9:1的溶液提取待测样品中的苦参碱，得到的提取液经强阳离子交换萃取柱净化提取复溶得到样品溶液；具体步骤如下：准确称取待测样品20g精确到0.001g，置于离心管中，准确加入乙腈和水体积比9:1的溶液50mL，设置250-400次/min的频率剧烈振摇10-15min，静置后放入离心机，3000r/min离心5min取上清液后，残渣继续用25mL乙腈和水体积比9:1的溶液提取，合并滤液于100mL容量瓶，加入1.0mol/L盐酸4mL，用乙腈和水体积比9:1的溶液定容，取出5mL滤液待净化；用5％氨化甲醇溶液活化强阳离子交换萃取柱，依次用甲醇和水预淋洗，5mL滤液全部过柱后，依次用水和甲醇淋洗强阳离子交换萃取柱，抽干；用5％氨化甲醇溶液洗脱萃取柱两次，洗脱液在40℃下氮气吹干，加入1.00mL流动相，涡旋30s，过0.22μm有机系滤膜供仪器测定；

配制苦参碱的标准溶液，按照浓度梯度配制多份标准系列溶液；

采用高效液相色谱法对所述样品溶液和标准品溶液进行检测分析，利用外标法得到苦参碱的含量。

优选的，标准系列溶液的配制包括如下步骤：精密称取适量苦参碱标准品，用甲醇溶解稀释并转移至容量瓶并定容，配制成适当浓度的苦参碱标准储备液，分别吸取适量储备液，用流动相配制成浓度0.1ug/ml，0.3ug/ml，0.5ug/ml，1.0ug/ml，5.0ug/ml，10.0ug/ml系列标准工作液。