[发明专利]利用三水相体系自发调控水解生成特定分子量的α-葡聚糖的方法及其应用

权利要求书

1.一种利用三水相体系自发调控水解生成特定分子量的α-葡聚糖的方法，其特征在于，包括如下步骤：

取聚丙二醇、聚乙二醇PEG4000和α-葡聚糖的混合液，震荡混合，静置分层，从上到下分成三层，上相为聚丙二醇相、中相为聚乙二醇相、下相为α-葡聚糖相，将α-葡聚糖酶加入到中相与下相接近两相界面处，轻微震荡后，保温，观察到中下相开始混合后，离心，此时液体分成上下两相，取下相，加入酒精，离心，取沉淀即为目标低分子量α-葡聚糖；向上述上相液体中加入硫酸镁溶液，震荡后静置分层得到两相，上相为聚丙二醇相，下相为盐溶液相，取下相，超滤脱盐浓缩后，获得α-葡聚糖酶回收液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的聚丙二醇、聚乙二醇PEG4000和α-葡聚糖的混合液中，聚丙二醇、聚乙二醇PEG4000和α-葡聚糖按质量比6.5～9:4～8:12～17；

所述的聚丙二醇、聚乙二醇PEG4000和α-葡聚糖的混合液中，α-葡聚糖由保藏编号为GDMCC1.473的肠膜明串珠菌通过摇瓶单批发酵制备得到。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的聚丙二醇、聚乙二醇和α-葡聚糖的混合液的溶剂为乙酸-乙酸钠缓冲液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的α-葡聚糖酶的加入量按总反应体系每增加1％的α-葡聚糖，α-葡聚糖酶的最终加入量则增加0.0005～0.0015U/mL。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的α-葡聚糖酶来源于菌和商业购买中的至少一种；所述的α-葡聚糖酶来源于菌时，所述的α-葡聚糖酶来源于保藏编号CCTCC No：M2013096的毕赤酵母工程菌。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的α-葡聚糖酶的酶活为0.5～1.5U/mL；

所述的保温的温度为40～50℃；

所述的离心的条件为：4000～6000rpm离心4～6min；

所述的酒精为80％～95％v/v的酒精。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的下相和酒精中酒精的终浓度为70％～90％v/v；

所述的加入酒精后离心的条件为：4000～6000rpm离心4～6min。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

所述的硫酸镁溶液中硫酸镁的质量分数为25％～36％w/w。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

所述的上相液体和硫酸镁溶液形成的体系中硫酸镁的加入量为体系的14％～15％w/w。

10.权利要求1-9任一所述的利用三水相体系自发调控水解生成特定分子量的α-葡聚糖的方法在食品和药品中的应用。