[发明专利]一种提高人体细胞衍生的细胞膜外囊泡中特定miRNA含量的方法在审
申请号: | 202011612853.2 | 申请日: | 2020-12-30 |
公开(公告)号: | CN114763523A | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
发明(设计)人: | 李萍;王静;沈美萍;戴成祥 | 申请(专利权)人: | 西比曼生物科技(上海)有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61K35/545;A61K35/28;A61P29/00;A61P11/00;A61P31/16;A61P31/14;A61P31/12;A61P31/04;A61P31/10;A61P37/02 |
代理公司: | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人: | 黄革生 |
地址: | 200233 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 提高 人体 细胞 衍生 细胞膜 外囊泡中 特定 mirna 含量 方法 | ||
1.一种提高细胞膜外囊泡中miRNA含量的方法,其特征在于,包括步骤:
(a)提供一干细胞;
(b)在合适的培养条件下,对所述干细胞进行预培养,从而获得融合度P为60-95%的经预培养的干细胞;
(c)在免疫调节因子存在下,对所述经培养的干细胞进行诱导培养,从而获得一发酵培养液,所述发酵培养液含经诱导培养的干细胞以及由经诱导培养的干细胞所产生的细胞膜外囊泡;其中,其中所述免疫调节因子包括干扰素;
(d)从上一步骤获得的所述发酵培养液中分离出所述的细胞膜外囊泡。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的分离出所述的细胞膜外囊泡中,选自下组的一种或多种miRNA含量增加:miR-146a、miR-21、let-7a或其组合。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的分离的细胞膜外囊泡具有选自下组的一个或多个特征:
(m1)相对表达量M1上升的miR-21(如miR-21-5p),较佳地M1≥3,更佳地为3-6;
(m2)相对表达量M2上升的miR-146a(如miR-146a-5p),较佳地M2≥3,更佳地为3-9;
(m3)相对表达量M3上升的let-7a(如let-7a-5p),较佳地M3≥3,更佳地为3-6;
其中,所述的相对表达量是与在相同条件但不含免疫调节因子的情况下所制得的细胞膜外囊泡(对照)中相对应miRNA的表达量相比得出的相对表达量(其中,对照的相对表达量定为1)。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的方法用于提高细胞膜外囊泡中具有抑炎活性的miRNA(或抑炎miRNA)的含量。
5.一种miRNA含量提高的细胞膜外囊泡,其特征在于,所述细胞膜外囊泡是通过权利要求1所述的方法获得的。
6.如权利要求5所述的外囊泡,其特征在于,所述外囊泡衍生自人体细胞。
7.一种药物组合物,其特征在于,包含:
(Z1)如权利要求2所述的细胞膜外囊泡;
(Z2)药物上可接受的载体。
8.一种药盒,其特征在于,所述药盒包含如权利要求3所述的药物组合物。
9.一种治疗疾病的方法,其特征在于,包括步骤:将权利要求2所述的细胞膜外囊泡施用于所需的对象。
10.如权利要求9所述的方法,其特征在于,所述的疾病选自下组:炎症性疾病、纤维化疾病、或其组合。
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