[发明专利]一种嵌合抗原受体纳米抗体外泌体及其纯化方法

权利要求书

1.一种嵌合抗原受体纳米抗体外泌体及其纯化方法，其特征在于，该外泌体为CAR-NB-exo，具体的其表面包括有三种抗体，第一种抗体为CD3抗体，第二种为CD33抗体，第三种为PD-L1纳米抗体。

2.根据权利要求1所述的一种嵌合抗原受体纳米抗体外泌体，其特征在于：所述CD3抗体能特异针对人T细胞表面。

3.根据权利要求1所述的一种嵌合抗原受体纳米抗体外泌体，其特征在于：所述CD33抗体为纳米抗体，CD33抗体特异识别急性髓样白血病细胞表面。

4.一种如权利要求1-3任意一项所述的嵌合抗原受体纳米抗体外泌体的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：在转染后第3和6天收集用表达构建体转染的Expi293细胞的培养基；

步骤二：通过差速离心和超速离心分离CAR-NB-exo；

1)、将细胞培养物以90g离心在4度下离心10分钟沉淀出悬浮细胞；

2)、收集的上清液然后以4,000g离心30分钟；

3)、然后以24,000g离心在4度下离心60分钟；

4)、然后以200,000g超速离心；

5)、将外泌体沉淀用PBS洗涤一次，重悬于PBS，并用0.2毫米滤镜过滤，即可获得纯化后的外泌体。