[发明专利]一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法

权利要求书

1.一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）、供试品溶液的制备：取丁香柿蒂散冻干粉0.2g，加入70%甲醇20mL，超声处理，放冷至室温，过滤，即得供试品溶液；

（2）、参照物溶液的制备：取鞣花酸、没食子酸、金丝桃苷和6-姜酚对照品，用70%甲醇溶解后，制得对照品溶液；

（3）、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250 mm， 内径为4.6mm，硅胶粒径为5 μm；检测器：二极管阵列检测器，分段波长检测，0～50min，波长245nm；50.00min～70min，波长210nm；柱温：30°；流速：0.8mL/min；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.1磷酸，梯度脱洗，所述梯度脱洗过程为：

0～10min，流动相A为5～15%，流动相B为95～85%，

10～30min，流动相A为15～30%，流动相B为85～70%，

30～50min，流动相A为30～50%，流动相B为70～50%，

50～65min，流动相A为50～95%，流动相B为50～5%，

65～70min，流动相A为95～95%，流动相B为5～5%；

（4）、测试：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各30μL，注入液相色谱仪，测定，即得；

（5）、构建丁香柿蒂散特征图谱：以步骤（4）中对照品溶液的特征图谱为参照图谱，从供试品溶液的特征图谱中选择共有峰，构建丁香柿蒂散的特征图谱。

2.如权利要求1所述的一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于：步骤（1）中，所述丁香柿蒂散冻干粉制备如下：丁香74g、柿蒂74g、人参37g、生姜111g，加水8倍量，提取60min，200目筛网过滤，收集药液，采用真空冷冻干燥机冻干，得到冻干粉。

3.如权利要求2所述的一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于：所述真空冷冻干燥机冻干程序如下：

预冻：温度：-50℃，维持温度：3h；压力：常压；

升华干燥：温度：-40℃，维持温度：1h；压力：0.0pa；

温度：-30℃，维持温度：1h；压力：0.0pa；

温度：-20℃，维持温度：2h；压力：0.0pa；

温度：-10℃，维持温度：3h；压力：0.0pa；

温度：0℃，维持温度：3h；压力：0.0pa；

（3）解析干燥：温度：10℃，维持温度：3h；压力：0.0pa；

温度：20℃，维持温度：2h；压力：0.0pa；

温度：30℃，维持温度：2h；压力：0.0pa；

温度：40℃，维持温度：2h；压力：0.0pa。

4.如权利要求1所述的一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于：步骤（2）中，取鞣花酸、没食子酸、金丝桃苷和6-姜酚，用70%甲醇溶解后，制得每1mL70%甲醇溶液中的含量为30μg的对照品溶液。

5.如权利要求1所述的一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于：供试品色谱中18个特征峰，其中与鞣花酸参照物相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内，各峰的规定值为：峰1 0.142、峰20.308、峰3 0.601、峰4 0.637、峰5 0.851、峰6 0.970、峰7为S峰 1.000、峰8 1.039、峰91.174、峰10 1.212、峰11 1.310、峰12 1.798、峰13 2.069、峰14 2.092、峰15 2.311、峰162.507、峰17 2.900、峰18 3.062。