[发明专利]一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法

说明书

本发明公开了一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法，包括以下步骤：取丁香柿蒂散冻干粉0.2g，加入70%甲醇20mL，超声处理30min，放冷至室温，过滤，即得供试品溶液；取鞣花酸、没食子酸、金丝桃苷和6~姜酚对照品，用70%甲醇溶解后，制得对照品溶液；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为190~400nm；柱温：20°~30°；流速：0.8mL/min；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.1磷酸，梯度脱洗；分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各30μL，注入液相色谱仪，测定；以上述中对照品溶液的特征图谱为参照图谱，从供试品溶液的特征图谱中选择共有峰，构建丁香柿蒂散的特征图谱。

技术领域

本发明属于中药检测技术领域，具体涉及一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法。

背景技术

丁香柿蒂散是由丁香、柿蒂、人参、生姜四味药组成，具有温中益气、降逆止呃之功效。主治虚寒呃逆。呃逆不已，胸脘痞闷，舌淡苔白，脉沉迟。本方所治“呃逆是由胃气虚寒，胃失和降所致。根据虚者补之、寒者温之、逆者降之的治疗原则，治当温中益气，降逆止呃。方中丁香辛温，温胃散寒，降逆止呃，是治疗胃寒呃逆之要药；柿蒂苦平，降逆止呃，专治呃逆，两药相配，温胃散寒，降逆止呃，共为君药。生姜辛温，为呕家圣药，与丁香、柿蒂合用，增强温胃降逆之功；因其胃虚，更配人参甘温益气补其虚，皆为臣药。4药合用，共奏温中益气、降逆止呃之功，使胃虚寒散，胃虚复，气逆平，则呃逆胸痞自除”。

目前对丁香柿蒂散的特征图谱或指纹图谱研究较少，本发明采用高效液相色谱法建立一种丁香柿蒂散的特征图谱检测方法，对评价丁香柿蒂散有重要意义。

发明内容

为解决前述问题，本发明提供一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种丁香柿蒂散高效液相特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、供试品溶液的制备：取丁香柿蒂散冻干粉0.2g，加入70％甲醇20mL，超声处理(功率600W，频率40kHz)，放冷至室温，采用0.45μm的过滤网过滤，即得供试品溶液；

(2)、参照物溶液的制备：取鞣花酸、没食子酸、金丝桃苷和6-姜酚对照品，用70％甲醇溶解后，制得对照品溶液；

(3)、色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料，柱长为250mm，内径为4.6mm，硅胶粒径为5μm；检测器：二极管阵列检测器，检测波长为190～400nm；柱温：20°～30°；流速：0.8mL/min；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.1磷酸，梯度脱洗；

(4)、测试：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各30μL，注入液相色谱仪，测定，即得；

(5)、构建丁香柿蒂散特征图谱：以步骤(4)中对照品溶液的特征图谱为参照图谱，从供试品溶液的特征图谱中选择共有峰，构建丁香柿蒂散的特征图谱。

优选的，步骤(1)中，所述丁香柿蒂散冻干粉制备如下：丁香74g、柿蒂74g、人参37g、生姜111g，加水8倍量，提取60min，200目筛网过滤，收集药液，采用真空冷冻干燥机冻干，得到冻干粉。

优选的，所述真空冷冻干燥机冻干程序如下：

(1)预冻：温度：-50℃，维持温度：3h；压力：常压；

(2)升华干燥：温度：-40℃，维持温度：1h；压力：0.0pa；

温度：-30℃，维持温度：1h；压力：0.0pa；

温度：-20℃，维持温度：2h；压力：0.0pa；

温度：-10℃，维持温度：3h；压力：0.0pa；

温度：0℃，维持温度：3h；压力：0.0pa；