[发明专利]一种能提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备与应用

说明书

本发明公开了一种能提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备与应用，将大豆蛋白粉过筛得到大豆蛋白微粉，加入去离子水搅拌均匀配制大豆蛋白溶液A，向悬浊液A中加入碱性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶进行分段水解，第一阶段采用碱性蛋白酶酶解，第二阶段通过复合蛋白酶及木瓜蛋白酶进行复合酶解得到大豆蛋白酶解液B，将酶解液离心取上清液C，进行超滤分离得到大豆肽D，采用大孔吸附树脂脱盐纯化得到大豆肽E，采用活性碳吸附色谱对大豆肽E进一步纯化，得到具有对枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量具有明显促进效果的大豆肽F。本发明可应用于发酵领域，且制备方法简单可控，适用于工厂量产。

技术领域

本发明涉及大豆蛋白肽制备领域，特别涉及一种提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备。

背景技术

大豆含有40％左右的蛋白质，超过其他任何粮食作物的蛋白质含量。大豆蛋白肽是大豆蛋白经蛋白酶水解或微生物发酵等方法所制得的分子量集中在1000Da以下并具有某些生物学功能的混合低聚肽。它既具有大豆蛋白质的营养学特性，也具有小分子肽所特有的物化特性。人体对大豆蛋白肽的吸收速率和吸收率均远高于大豆蛋白。而且，大豆蛋白肽对于生命活动发挥着重要的作用，在抗高血压。抗胆固醇、抗血栓的形成、消除人体的疲劳、保护肝脏、防止动脉粥样硬化、增强人体体能和肌肉力量等方面具有显著的效果。此外，大豆蛋白肽对微生物有增值效果，并促进有益菌代谢分泌，被广泛用于发酵工业。在医药行业中，大豆多肽含有降血压肽、将胆固醇肽、抗血栓肽等肽段，可生产出相应功效的药品。在化妆品行业中，大豆多肽含有一种类似于胰岛素的白蛋白多肽，是胰岛素的生长因子，具有保护人体表皮细胞，消除体内自由基，防止黑色素沉淀、抗衰老等功效，可以广泛地应用到化妆品行业中。在饲料行业中，大豆多肽包含一些寡肽，这些寡肽在动物胃肠道中不水解，不受抗营养因子的干扰而直接吸收，且比单个氨基酸的吸收速度快。大豆多肽可以替代饲料中的抗生素药物。

纳豆激酶具有很强的溶解血栓的功能，于目前临床所用的尿激酶、链激酶等溶栓药物相比，具有安全性好，易被人体吸收，作用直接迅速，药效持续时间长等优点。目前用于产纳豆激酶的菌株有保加利亚乳杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌、乳酸菌、大肠杆菌、巴斯德毕赤酵母菌等，本文中提供一种大豆蛋白肽可以提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量。专利《一种高分泌纳豆激酶的枯草芽孢杆菌及其应用》中记载,获得的纳豆激酶酶活最高达到10672.5Fu/g。

目前，已有通过酶解、发酵等方法将从大豆蛋白中获得大豆蛋白肽，但由于获得大豆蛋白肽后没有进一步分离或分离工艺简单，所得大豆蛋白肽纯度较低，没有发现其具有明显提高枯草芽孢杆菌的纳豆激酶产量的功效。为此，本发明提供一种具有提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备方法。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术中蛋白肽不具有提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的缺陷，而提出的一种具有提高纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备方法。该方法的要点在于结合生物酶解技术、超滤分离技术、大孔树脂吸附分离以及活性炭吸附技术高效释放和收集大豆蛋白酶解产物中具有促进枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆肽。

本发明的另一目的在于提供上述大豆肽的用途。

为了实现上述目的，本发明采取了以下步骤，

一种具有提高枯草芽孢杆菌纳豆激酶产量的大豆蛋白肽的制备方法，包括以下步骤，

S1，将大豆蛋白粉经筛后得到大豆蛋白微粉，加入蒸馏水配制一定浓度的大豆蛋白悬浊液A；

S2，将悬浊液A置于90～100℃的水中一定时间，并在冷却后加入亚硫酸钠以破坏蛋白的空间结构；

S3，调节大豆蛋白悬浊液的pH后，加入蛋白酶对其进行酶解；

S4，酶解一定时间后得到酶解液B，将酶解液B送入沸水中灭酶；

S5，将S4所得酶解液B放入离心机中离心分离，得到上清液C；