[发明专利]一组用于检测丹毒丝菌属相关菌种的引物组合、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 202011623704.6 | 申请日: | 2020-12-31 |
公开(公告)号: | CN112626245A | 公开(公告)日: | 2021-04-09 |
发明(设计)人: | 吴森;王绪敏;方向东;单广乐 | 申请(专利权)人: | 中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心) |
主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 尉月丽 |
地址: | 100101 北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一组 用于 检测 丹毒 属相 菌种 引物 组合 试剂盒 方法 | ||
1.一组用于检测丹毒丝菌属相关菌种的引物组合,其特征在于,所述的引物组合包括以下核苷酸序列:检测Erysipelothrix rhusiopathiae strFujisawa(firmicutes)的引物对由SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示的两条核苷酸序列组成;检测Erysipelothrixrhusiopathiae strNCTC8163的引物对由SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示的两条核苷酸序列组成。
2.权利要求1所述的引物组合在制备丹毒丝菌属相关菌种的检测试剂盒和/或制剂中的应用。
3.一种丹毒丝菌属相关菌种的检测试剂盒,其特征在于,所述的检测试剂盒包括权利要求1所述的引物组合。
4.根据权利要求3所述的检测试剂盒,其特征在于,所述的检测试剂盒还包括PCR试剂,所述的PCR试剂包括MgSO4、dNTPs、10×KOD-Plus-Neo Buffer和KOD-Plus-Neo。
5.一种丹毒丝菌属相关菌种的检测方法,其特征在于,是采用权利要求3或4所述的检测试剂盒进行PCR检测。
6.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于,所述的PCR检测的反应体系包括:10ng/μL待测样品基因组DNA 2μL,10μM引物各0.75μL,25mM MgSO4 3μL,2mM dNTPs5μL,10×KOD-Plus-Neo Buffer 5μL,KOD-Plus-Neo 1μL,ddH2O补至50μL。
7.根据权利要求5所述的检测方法,其特征在于,所述的PCR检测的反应程序为:94℃预变性120sec;98℃变性10sec,50℃退火30sec,68℃延伸30sec,20个循环;68℃延伸10min。
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