[发明专利]一种改善氧化微环境的ROS响应性仿生纳米粒及制备方法

权利要求书

1.一种改善氧化微环境的ROS响应性仿生纳米粒的制备方法，其特征是包括如下步骤：

（1）将细胞浸于低渗溶液中10-60 min，离心，用低渗溶液洗涤3-6次，去除细胞内容物，冰浴条件下10%-30%剪切率超声探头超声5-30 min，冻干，得到纳米级细胞膜；

（2）按比例，将5-50 mg药物溶于0.1- 0.5 mL第一种溶剂中，得到溶液一，将50-300 mgROS响应性的聚合物材料溶于1- 5 mL第二种溶剂中，得到溶液二，在冰浴条件下10%-30%剪切率超声探头超声3-10 min；在超声的同时，将溶液一滴加到溶液二中；

（3）按比例，在容器中加入10-30 mL质量浓度为0.1%-5%的乳化剂水溶液，再加入5-30mg步骤（1）获得的纳米级细胞膜，在冰浴条件下10%-30%剪切率超声探头超声10-20 min；在超声的同时，滴入步骤（2）获得的液体；

（4）挥发溶剂，在15000-30000 rpm条件下，离心15-40 min，蒸馏水洗涤3-6次并冷冻干燥，得到一种改善氧化微环境的ROS响应性仿生纳米粒；

所述ROS响应性的聚合物材料用下述步骤制成：

a聚酯类单体在引发剂和催化剂的作用下，通过聚合得到平均分子量8000-100000的聚酯；

b以步骤a获得的聚酯为原料制备聚酯-Ar-OH；用平均分子量2000-6000的PEG合成PEG-Ar-OH，

c通过PEG-Ar-OH与过量草酰氯反应得到PEG-Ar-OCOCOCl；

d过量的PEG-Ar-OCOCOCl与聚酯-Ar-OH反应，得到ROS响应性的聚合物材料；

所述Ar为苯环或通过酯键连接的双苯环；

所述聚酯类单体、引发剂和催化剂的摩尔比为（6000-100000）：（50-200）：1；

聚酯类单体为乙交酯、丙交酯、羟基乙酸、羟基丙酸、羟基丁酸、丁二酸、丁二醇、戊内酯和己内酯中至少一种；

引发剂为乙二醇，丙二醇，丁二醇，三羟甲基乙烷，丙三醇，季戊四醇，丁四醇，戊五醇，环戊五醇或肌醇；

催化剂为辛酸亚锡，异辛酸亚锡，氢氧化铝，异丙醇铝或醋酸锌

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是细胞为红细胞、血小板、巨噬细胞、中性粒细胞、T细胞、B细胞或内皮细胞。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是低渗溶液为0.25×生理盐水或0.25×0.01M、pH=7.4的PBS。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述药物包括普罗布考、阿托伐他汀、阿司匹林、二甲双胍或吲哚美辛。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是第一种溶剂为二氯甲烷、丙酮、二甲基亚砜、乙酸乙酯、水、乙醇和甲醇中至少一种。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是第二种溶剂为二氯甲烷、丙酮、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、四氢呋喃和乙酸乙酯中至少一种。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征是所述乳化剂为聚乙烯醇、聚氧乙烯醚、聚氧丙烯醚、环氧乙烷和环氧丙烷嵌段共聚物、十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钠或磷酸钠

8.权利要求1-7之一的制备方法制备的改善氧化微环境的ROS响应性仿生纳米粒。