[发明专利]利用生物酶解制备芹菜素的方法

说明书

本发明公开了一种利用生物酶解制备芹菜素的方法，S1、酶解：向反应容器中加入野漆树苷与水或低级醇溶液，混合均匀，加热升温至70℃以上保温，再冷却至60℃以下，加入酸调节pH值，加入复合酶进行酶解反应，复合酶包括鼠李糖苷酶和葡萄糖苷酶，检测野漆树苷是否反应完全，酶解反应完成后升温将复合酶灭火，获得反应液；S2、分离：将反应液过滤，获得芹菜素粗晶，将芹菜素粗晶与醇溶液混合并搅拌至芹菜素粗晶完全溶解，获得复溶液；S3、纯化：复溶液冷却结晶，过滤，获得芹菜素。本发明的利用生物酶解制备芹菜素的方法采用生物酶催化，将野漆树苷水解成芹菜素，操作简单方便，绿色无污染，适合大规模生产。

技术领域

本发明涉及芹菜素领域，特别地，涉及一种利用生物酶解制备芹菜素的方法。

背景技术

芹菜素是天然存在的一种黄酮类化合物，以植物黄色素的形式存在于多种植物中，主要来源于伞形科植物旱芹，其他植物如洋甘菊、蜜蜂花、紫苏、马鞭草、西洋蓍草中也发现有它的存在。芹菜素的分子式为C₁₅H₁₀O₅，分子量为270，熔点345℃～350℃，难溶于水，易溶于热乙醇、二甲基亚砜、稀碱等溶剂。具有舒张血管，降压降脂、抗肿瘤、消炎、抗氧化、预防多种癌症等生物活化。由于芹菜素具有良好的生物活化，故而在功能性食品、医药和化妆品领域具有很广泛的应用前景。

现有的芹菜素制备方法主要有两种：一是直接从植物中提取，二是以黄烷酮为原料半合成。植物提取工艺工序复杂，植物中芹菜素含量低，芹菜素纯化困难，产品是纯度和收率低，从而造成了原材料的过度消耗与浪费，成本太高，不适合规模化生产，因此，在应用过程中因纯度较低，治疗与保健效果不理想。半合成芹菜素是以柚皮素脱氢氧化或者野漆树苷酸解产生。柚皮素脱氢氧化是在碱性环境下，以柚皮素作为原料，在溶剂1,4-二氧环己烷、二甲亚砜、吡啶、二甲基甲酰胺中，50℃～130℃温度下与氧化剂碘反应，脱氢生成芹菜素。该方法使用有毒的有机溶剂和氧化剂，产生有害废水，污染环境，不符合绿色化学理念。野漆树苷酸解是高温条件下发生酸水解反应，具有不易控制、收率较低、能耗高、消耗水量大等缺点。

发明内容

本发明提供了一种利用生物酶解制备芹菜素的方法，以解决现有的芹菜素制备方法工艺复杂、收率低、能耗高的技术问题。

本发明采用的技术方案如下：

一种利用生物酶解制备芹菜素的方法，包括以下步骤：S1、酶解：向反应容器中加入野漆树苷与水或低级醇溶液，混合均匀，加热升温至70℃以上保温，再冷却至60℃以下，加入酸调节pH值，加入复合酶进行酶解反应，复合酶包括鼠李糖苷酶和葡萄糖苷酶，检测野漆树苷是否反应完全，酶解反应完成后升温将复合酶灭火，获得反应液；S2、分离：将反应液过滤，获得芹菜素粗晶，将芹菜素粗晶与醇溶液混合并搅拌至芹菜素粗晶完全溶解，获得复溶液；S3、纯化：复溶液冷却结晶，过滤，获得芹菜素。

进一步地，步骤S3中的过滤后的滤液进行旋转蒸发至无醇味，获得浓缩液，将浓缩液进行冷冻干燥，获得芹菜素。

进一步地，步骤S1中复合酶先进行活化，再进行酶解反应；复合酶活化包括：将鼠李糖苷酶溶于水中进行活化获得鼠李糖苷酶液，将葡萄糖苷酶溶于水中进行活化获得葡萄糖苷酶液，将鼠李糖苷酶液与葡萄糖苷酶液混合，鼠李糖苷酶液与葡萄糖苷酶液的酶比活力为10000～20000∶10000；复合酶的体积与野漆树苷的质量比为2～6∶40。

进一步地，复合酶的酶解反应时间为0.5h～72h，酶解反应温度为20℃～75℃。

进一步地，步骤S1中向反应容器中加入野漆树苷与低级醇溶液，低级醇溶液采用含碳数为Cl～C6的一元醇，二元醇或三元醇，低级醇溶液中低级醇的浓度为20％～100％，野漆树苷的质量与低级醇溶液的体积比为1∶5～40。

进一步地，步骤S1中向反应容器中加入野漆树苷与水，野漆树苷的质量与水的体积比为1∶5～40。