[发明专利]用于抗缪勒管激素检测的组合物及应用和磁微球电化学发光免疫检测试剂盒与检测方法

权利要求书

1.用于抗缪勒管激素(AMH)检测的组合物，其特征在于，包括AMH试剂Ra、AMH试剂Rb、链霉亲和素超顺磁微球；

所述AMH试剂Ra包括含生物素标记的抗AMH单克隆抗体；

所述AMH试剂Rb包括含三联吡啶钌标记的抗AMH单克隆抗体；

所述链霉亲和素超顺磁微球包括表面包裹带有链霉亲和素的超顺磁微球。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述超顺磁微球的粒径在1.5～5.0μm。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述AMH试剂Ra中，每个抗体分子表面的生物素分子标记量为2～5个；所述AMH试剂Rb中，每个抗体分子表面的钌分子标记量为2～10个。

4.如权利要求1至3任一项所述的组合物，其特征在于，所述AMH试剂Ra的制备方法为：在缓冲液存在的条件下，取抗AMH单克隆抗体与生物素混合，制得所述AMH试剂Ra；所述缓冲液包括pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的磷酸盐缓冲液或pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。

5.如权利要求1至3任一项所述的组合物，其特征在于，所述AMH试剂Rb的制备方法为：在缓冲液存在的条件下，取抗AMH单克隆抗体与三联吡啶钌混合，制得所述AMH试剂Rb；所述缓冲液包括pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的磷酸盐缓冲液或pH＝7.4～7.8、20mM～200mM的三羟甲基氨基甲烷缓冲液。

6.如权利要求1至3任一项所述的组合物，其特征在于，还包括定标品和/或清洗液；所述清洗液包括浓度150～200mmol/L的三丙胺和浓度200～400mmol/L的磷酸盐缓冲液；或浓度80～100mmol/L的二丁基乙醇胺和浓度200～400mmol/L的磷酸盐缓冲液。

7.如权利要求1至3任一项所述的组合物，其特征在于，所述AMH试剂Ra、所述AMH试剂Rb与所述链霉亲和素超顺磁微球的体积比为(50～80)：(50～80)：(20～40)。

8.如权利要求1至7任一项所述的组合物在制备抗缪勒管激素(AMH)的磁微球电化学发光免疫检测试剂盒中的应用。

9.一种抗缪勒管激素(AMH)的磁微球电化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1至7任一项所述的组合物以及检测可接受的试剂。

10.一种抗缪勒管激素(AMH)的磁微球电化学发光免疫检测方法，其特征在于，该方法基于如权利要求1至7任一项所述的组合物或如权利要求9所述的试剂盒，包括如下步骤：

步骤1：取样本，依次加入AMH试剂Ra和AMH试剂Rb，于37℃孵育8～12min，最后加入链霉亲和素超顺磁微球，于37℃孵育8～12min，获得反应液；其中，样本、AMH试剂Ra、AMH试剂Rb与链霉亲和素超顺磁微球的体积比为15：(50～80)：(50～80)：(20～40)；

步骤2：将所述反应液用磁铁吸附；

步骤3：取清洗液，清洗未结合到超顺磁微球上的标记钌的抗体和样本，通电，在所述清洗液存在的条件下三联吡啶钌发光；

步骤4：记录发光值，建立标准曲线，根据建立的标准曲线，获得样本中AMH的浓度。