[发明专利]一种用于鳜鱼气泡解冻的解冻保护液及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种用于鳜鱼气泡解冻的解冻保护液，其特征在于，包括鱼油和鱼下脚料蛋白酶解产物；所述鱼下脚料蛋白酶解产物的质量为鱼油的20-30wt%。

2.一种如权利要求1所述解冻保护液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（I）将鱼下脚料碾碎，加入水调节料液比至1g:2-5mL后，在80-90℃下加热30-40min，获得粗提混合液；

（II）将粗提混合液冷却至30-40℃后，将pH调节至7-7.5，而后加入中性蛋白酶偶联羟基磷灰石，分散均匀后，在30-37℃、搅拌条件下酶解3-4h，获得酶解液；

（III）对酶解液进行离心后，取上清液，静置分层，分离水相和油相，油相即为鱼油；将水相减压浓缩、喷雾干燥后，获得鱼下脚料蛋白酶解产物；

（IV）将鱼下脚料蛋白酶解产物分散到鱼油中，所述鱼下脚料蛋白酶解产物的质量为鱼油的20-30wt%，制得解冻保护液。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（I）中，所述鱼下脚料包括鱼皮、鱼骨、鱼鳞、鱼内脏中的一种或多种。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（II）中，所述中性蛋白酶偶联羟基磷灰石的添加量为粗提混合液的5-10wt%。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤（II）中，所述中性蛋白酶偶联羟基磷灰石的制备方法如下：

（i）羟基磷灰石改性：将氨基硅烷偶联剂分散到酒精中，调节pH至5-6，在20-30℃下水解30-40min后，加入羟基磷灰石，在50-60℃下搅拌反应1.5-2.5h，离心分离，去除上清液后，获得氨基改性羟基磷灰石；

（ii）中性蛋白酶偶联：将中性蛋白酶分散到MES缓冲液中，加入NHS和EDC，在20-30℃下活化30-40min后，加入氨基改性羟基磷灰石，在20-30℃下反应1-2h，离心分离，去除上清液，将沉淀洗净、干燥后，获得中性蛋白酶偶联羟基磷灰石。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤（i）中，所述氨基硅烷偶联剂为γ-氨丙基三甲氧基硅烷、γ-氨丙基三乙氧基硅烷、N-(β-氨乙基)-γ-氨丙基三甲氧基硅烷、N-(β-氨乙基)-γ-氨丙基甲基二甲氧基硅烷中的一种或多种。

7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤（i）中，所述氨基硅烷偶联剂与羟基磷灰石的质量比为1.5-3.5:1。

8.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤（ii）中，所述中性蛋白酶与氨基改性羟基磷灰石的质量比为1-2:1。

9.一种利用权利要求1所述解冻保护液进行鳜鱼气泡解冻的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）初步解冻：将冷冻鳜鱼置于1-5℃静水中解冻15-25min，获得初步解冻鳜鱼；

（2）浸涂解冻保护液：将初步解冻鳜鱼在解冻保护液中浸渍15-20min后，取出，沥干；

（3）气泡解冻：将浸涂解冻保护液后的鳜鱼置于食盐水中，先在15-25Hz的气泡频率、5-10℃的水温下解冻20-30min，再在50-60Hz的气泡频率、12-15℃的水温下解冻20-30min。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述食盐水中，氯化钠的质量分数为2-3wt%。