[发明专利]飞蝗Rab5基因及其dsRNA在飞蝗防治中的应用有效

专利信息
申请号: 202011630624.3 申请日: 2020-12-31
公开(公告)号: CN112662690B 公开(公告)日: 2022-07-19
发明(设计)人: 王艳丽;范云鹤;李涛;史学凯;张建珍 申请(专利权)人: 山西大学
主分类号: C12N15/55 分类号: C12N15/55;C12N15/10;C12N15/113;C12N15/11;A01N63/60;A01P7/04
代理公司: 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 代理人: 郭海燕
地址: 030006*** 国省代码: 山西;14
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摘要:
搜索关键词: 飞蝗 rab5 基因 及其 dsrna 防治 中的 应用
【权利要求书】:

1.一种飞蝗Rab5基因,其特征在于:所述飞蝗Rab5基因全长的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。

2.一种权利要求1所述的飞蝗Rab5基因的获得方法,其特征在于:包括以下步骤:

步骤1,基于飞蝗转录组数据库,采用生物信息学方法搜索飞蝗Rab5基因的序列;

步骤2,根据步骤1获得的序列,设计并合成其上、下游引物;

步骤3,提取飞蝗3龄若虫总RNA,采用M-MLV反转录酶将所提RNA反转录成第一链cDNA,获得PCR扩增反应所需模板;

步骤4,利用步骤2的引物和步骤3的模板,通过PCR扩增反应获得飞蝗Rab5基因。

3.根据权利要求2所述的一种飞蝗Rab5基因的获得方法,其特征在于,所述步骤2中上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。

4.一种基于权利要求1所述的飞蝗Rab5基因合成的dsRNA,其特征在于:所述dsRNA其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

5.一种用于合成权利要求4所述的dsRNA的引物对,其特征在于,包括上游引物和下游引物,均含有T7启动子,上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ IDNO:6所示。

6.一种权利要求4所述的dsRNA的合成方法,其特征在于,包括以下步骤:根据飞蝗Rab5基因设计用于合成dsRNA的上、下游引物,引物序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示,以测序正确的LmRab5全长质粒作为模板,PCR扩增后,扩增产物经试剂盒纯化,按照试剂盒说明书体外转录合成dsRNA。

7.一种权利要求4所述的dsRNA在飞蝗防治中的应用。

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