[发明专利]飞蝗Rab5基因及其dsRNA在飞蝗防治中的应用有效
申请号: | 202011630624.3 | 申请日: | 2020-12-31 |
公开(公告)号: | CN112662690B | 公开(公告)日: | 2022-07-19 |
发明(设计)人: | 王艳丽;范云鹤;李涛;史学凯;张建珍 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
主分类号: | C12N15/55 | 分类号: | C12N15/55;C12N15/10;C12N15/113;C12N15/11;A01N63/60;A01P7/04 |
代理公司: | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人: | 郭海燕 |
地址: | 030006*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 飞蝗 rab5 基因 及其 dsrna 防治 中的 应用 | ||
1.一种飞蝗Rab5基因,其特征在于:所述飞蝗Rab5基因全长的核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。
2.一种权利要求1所述的飞蝗Rab5基因的获得方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1,基于飞蝗转录组数据库,采用生物信息学方法搜索飞蝗Rab5基因的序列;
步骤2,根据步骤1获得的序列,设计并合成其上、下游引物;
步骤3,提取飞蝗3龄若虫总RNA,采用M-MLV反转录酶将所提RNA反转录成第一链cDNA,获得PCR扩增反应所需模板;
步骤4,利用步骤2的引物和步骤3的模板,通过PCR扩增反应获得飞蝗Rab5基因。
3.根据权利要求2所述的一种飞蝗Rab5基因的获得方法,其特征在于,所述步骤2中上、下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
4.一种基于权利要求1所述的飞蝗Rab5基因合成的dsRNA,其特征在于:所述dsRNA其中一条链的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
5.一种用于合成权利要求4所述的dsRNA的引物对,其特征在于,包括上游引物和下游引物,均含有T7启动子,上游引物和下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO:5和SEQ IDNO:6所示。
6.一种权利要求4所述的dsRNA的合成方法,其特征在于,包括以下步骤:根据飞蝗Rab5基因设计用于合成dsRNA的上、下游引物,引物序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示,以测序正确的LmRab5全长质粒作为模板,PCR扩增后,扩增产物经试剂盒纯化,按照试剂盒说明书体外转录合成dsRNA。
7.一种权利要求4所述的dsRNA在飞蝗防治中的应用。
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