[发明专利]新型鸭呼肠弧病毒卵黄抗体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体及其制备方法和应用。其制备方法包括：(1)制备鸭呼肠孤病毒抗原；(2)将制备的鸭呼肠病孤毒抗原灭活后加油佐剂混合乳化制备得到鸭呼肠孤病毒病灭活疫苗；(3)用灭活疫苗免疫产蛋鸡，收集高免鸡蛋，提取卵黄抗体。本发明制备的新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体抗体可安全、有效的预防鸭呼肠孤病毒引起的以各个年龄阶段鸭脾脏肿大、出血和坏死，导致种鸭产蛋和肉鸭体重的下降，料肉比升高，肉鸭出栏合格率显著降低等临床症状，能够有针对性的防治鸭呼肠孤病毒的感染与爆发，同时简化了生产工艺，可规模化生产并应用于临床。

技术领域

本发明涉及卵黄抗体，尤其涉及新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体及其制备方法，本发明进一步涉及该新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体在防治新型鸭呼肠孤病毒病，属于鸭呼肠孤病毒卵黄抗体及其制备领域。

背景技术

新型鸭呼肠孤病毒(Novel Duck Reovirus，NDRV)病又称“鸭坏死性肝炎”，该病毒在血清学上完全不同于之前的番鸭呼肠孤病毒，是鸭的一种以肝脏不规则坏死、出血斑/点和心肌、法氏囊出血为主要特征的传染性疾病，番鸭、半番鸭、麻鸭和北京鸭等各品种的鸭均可发病，该病无明显季节性，发病鸭一般为3～25日龄，鸭的日龄愈小，发病率和死亡率愈高。NDRV的感染严重损害鸭免疫器官，造成免疫抑制，导致其他传染病的继发。该病最先于2005年在中国的福建、浙江和广东等地鸭群中出现和流行，后蔓延至全国，近年来由于该病毒的肆虐给我国养鸭业造成较大的经济损失，现地急需能有效的疫苗或抗体对该病进行防治。

卵黄抗体(egg yolk antibodies，IgY)是指产蛋鸡受特定抗原免疫后产生并转移和贮存在卵黄中的特异性抗体，从蛋黄中将IgY提取并应用在动物疾病的防治中已得到广泛认可。卵黄抗体作为疫病的有效防控手段有安全性高、起效快、特异性强的特点一直被受现地养殖用户的青睐与关注，但由于国内卵黄抗体提取方法繁多，提取方法各异，导致抗体品质差异较大，其中效价损失大、纯度低、脂类物质大量残留等问题尤为突出。

发明内容

本发明的目的之一提供一种安全、高效、适用于企业大规模生产的鸭呼肠孤病毒卵黄抗体；

本发明的目的之二是提供一种制备所述新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体的方法。

本发明的目的之三是将所述的新型鸭呼肠孤病毒卵黄抗体用于预防鸭呼肠孤病毒引起的各种疾病。

本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：

本发明提供了一种鸭呼肠孤病毒病卵黄抗体，其制备方法包括：

(1)制备鸭呼肠孤病毒抗原；

(2)将制备的鸭呼肠孤病毒抗原灭活后加油佐剂混合乳化制备得到鸭呼肠孤病毒病灭活疫苗；

(3)用灭活疫苗免疫产蛋鸡，收集高免鸡蛋，提取卵黄抗体，即得。

步骤(1)所述的鸭呼肠孤病毒抗原的制备方法包括，将鸭呼肠孤病毒疫苗株接种鸡肝癌细胞(LMH)，培养后收获细胞液，即得；其中，所述的鸭呼肠孤病毒疫苗株可以是任何一种能够通过商业途径购买或自行分离得到的鸭呼肠孤病毒疫苗株，作为本发明的一种具体的实施方式，本发明采用了新型鸭呼肠孤病毒疫苗S株，其保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.20000；

作为本发明一种具体的实施方式，步骤(2)中所述的制备鸭呼肠孤病毒病灭活疫苗的方法包括，

(a)油相制备；将白油和硬脂酸铝混合均匀后加热再加入司本-80再升温加热后冷却，即得；优选的，将注射用白油、硬脂酸铝以95份:1份的比例混匀并加热至80℃，再加入5份司本-80至温度达到115℃时维持40min，冷却后备用；