[发明专利]多肽混合物高效液相色谱分析方法

权利要求书

1.一种采用高效液相色谱法对醋酸格拉替雷进行线性或阶梯式梯度洗脱，并分析该共聚物各组分含量是否合格的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，

步骤(1)配置待测醋酸格拉替雷溶液；

步骤(2)以阳离子交换液相色谱法，对待测样本进行梯度洗脱，

步骤(3)检测分析共聚物各组分对应峰面积，通过与对照品比对，确定待测样本各组分含量范围是否合格。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，

步骤(2)所述采用阳离子交换液相色谱法的色谱条件为：

采用叔铵基键合聚苯乙烯-二乙烯苯颗粒为填料的色谱柱，所述的色谱柱填料颗粒粒径为1.7-10μm；

以含10-50mM的2-(N-吗啉代)乙磺酸、0.5-5mM的EDTA溶液为流动相A，用NaOH溶液调pH值至4-6；

以含10-50mM的2-(N-吗啉代)乙磺酸、0.5-5mM的EDTA、1-2.5M的NaCl的溶液为流动相B，用NaOH溶液调pH至5-7；

进样量5-50uL，样品浓度1-20mg/ml，

流速0.5-1.5mL/min，洗脱时间50-250min；

洗脱梯度为：

总洗脱时间等分为N(2≤N≤20)步依次进行梯度洗脱，前N-1步梯度中流动相A的比例由100％渐次降至0％，流动相B的比例由0渐次升至100％，第N步时流动相A比例为90％，流动相B为10％；

优选的，5≤N≤15，更优选的，8≤N≤12，最优选的，N＝10；

柱温25-50℃。

3.根据权利要求1-2任一所述的方法，其特征在于，

步骤(3)所述的检测分析采用紫外检测器检测波长260-280nm；

采用荧光检测器时，其激发波长为230nm，发射波长为300nm。