[实用新型]猪瘟病毒E2＆E0抗体检测试剂盒

说明书

本实用新型一方面公开了一种猪瘟病毒E2＆E0抗体检测试剂盒，该试剂盒能同时检测猪瘟病毒E2抗原抗体和E0抗原抗体，该试剂盒有一个盒体(1)，盒体(1)内设有抗原包被板存放槽(2)、质控品存放槽(3)、阳性对照液孔槽(4)、阴性对照液孔槽(5)、羊抗猪IgG酶标抗体孔槽(6)、浓缩洗涤液孔槽(7)、样品稀释液孔槽(8)、显色液孔槽(9)、终止液孔槽(10)和操作说明书存放槽(11)；抗原包被板存放槽(2)内放置抗原包被反应板，各孔槽中(3‑10)放置装有相应溶液的试剂瓶，操作说明书存放槽(11)内放置操作说明书。本实用新型的试剂盒能够实现同时检测CSFV‑E2蛋白抗体和CSFV‑E0蛋白抗体。另外本实用新型的试剂盒稳定性好、灵敏度高、特异性强，能够适用于大规模临床检测。

技术领域

本实用新型属于病毒疫病诊断技术和动物检疫领域，具体涉及一种猪瘟病毒E2E0抗体检测试剂盒。

背景技术

猪瘟在欧洲称为古典猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的一种急性、热性、致死性疾病。猪瘟具有高度接触传染性、发病急、高热稽留和小血管壁变性引起广泛出血、梗塞和坏死等病变特征。家养和野生猪是其唯一的天然宿主。世界动物卫生组织(OIE)将其定为A类传染病，我国《动物防疫法》将其列为一类传染病。猪瘟是目前危害我国养猪业发展的主要疫病之一。

猪瘟病毒属于黄病毒科、瘟病毒属成员，为单链线状RNA病毒。病毒粒子略呈圆形，具有脂蛋白囊膜，病毒粒子表面有脆弱的纤突结构。CSFV基因组长约12.5kb，仅含有1个大的开放性阅读框(ORF)，此ORF编码约3898个氨基酸残基，分子量约438kDa的多聚蛋白。此多聚蛋白在翻译的同时和在翻译后经病毒与宿主细胞蛋白酶加工成12种成熟蛋白，依次为N_pro,C,E0(也称Erns),E1,E2,p7,NS2,NS3,NS4A,NS4B,NS5A,NS5B，其中C,E_rns,E1和 E2为结构蛋白,其余为非结构蛋白。其中E0和E2是CSFV最主要的免疫原性蛋白，能够诱导机体产生中和抗体并且能够保护猪抵抗CSFV强毒株的攻击，是研究猪瘟基因工程疫苗的重要靶蛋白，同时也是猪瘟疫苗免疫后诊断用最重要的靶蛋白。

但是，目前市面流行的用于评价CSFV免疫效果的试剂盒基本都只能检测E2蛋白产生的抗体，不能评价E0蛋白产生的抗体，因此对CSFV疫苗免疫后的实际情况的评价可能存在一定的假阴性的检测。

实用新型内容

为了弥补现有技术的不足，本实用新型的目的之一是提供一种能同时评价CSFV-E2蛋白和CSFV-E0蛋白的抗体的试剂盒，以弥补现有试剂盒技术的不足。

因此，本实用新型一方面提供了一种猪瘟病毒E2E0抗体检测试剂盒，所述试剂盒能同时检测猪瘟病毒E2抗原抗体和E0抗原抗体，所述的试剂盒有一个盒体(1)，盒体(1)内设有抗原包被板存放槽(2)、质控品存放槽(3)、阳性对照液孔槽(4)、阴性对照液孔槽(5)、羊抗猪IgG 酶标抗体孔槽(6)、浓缩洗涤液孔槽(7)、样品稀释液孔槽(8)、显色液孔槽(9)、终止液孔槽(10) 和操作说明书存放槽(11)；抗原包被板存放槽(2)内放置抗原包被反应板，各孔槽中(3-10)放置装有相应溶液的试剂瓶，操作说明书存放槽(11)内放置操作说明书。

优选地，本实用新型所述的抗原包被板为同时包被有CSFV-E2蛋白和CSFV-E0蛋白的酶标板，所述的抗原包被板上CSFV-E2蛋白和CSFV-E0蛋白的包被浓度均为100ng/孔/100μL，每个试剂盒含有2块或5块抗原包被板。

优选地，本实用新型所述的样品稀释液为含有2％BSA的1×PBST溶液，每个试剂盒含有80mL/瓶或200mL/瓶。

优选地，本实用新型所述的浓缩洗涤液为25×PBST溶液，在使用前稀释到1×PBST溶液，每个试剂盒含有30mL/瓶或60mL/瓶。