[发明专利]用于增强癌症患者的CD8+T细胞依赖性免疫应答的方法和药物组合物

说明书

通过释放耗尽的CD8⁺T细胞从而恢复抗肿瘤免疫应答，靶向免疫检查点如程序性细胞死亡1(PD1)改进了癌症患者的生存率。然而，大多数患者复发或对免疫检查点阻断疗法无效。在本文中，发明人展示了NRP1在PD1+CD8+T细胞的溶细胞突触中被募集，相互作用并增强PD‑1活性。在小鼠中，Nrp1的CD8+T细胞特异性缺失改进自发的和抗PD1抗体的抗肿瘤免疫应答。同样，在人转移性黑色素瘤中，肿瘤浸润性CD8+T细胞中的NRP1表达预示用抗PD1(例如派姆单抗)治疗的患者的预后不佳。最后，抗NRP1和抗PD1抗体的组合在人中具有协同作用，特别是在CD8+T细胞抗肿瘤应答中。因此，单独的NRP1，或与免疫检查点抑制剂(例如抗PD1抗体)结合的治疗性抑制可以有效抑制人癌症中的肿瘤生长。本发明还涉及包含至少一个特异性结合免疫检查点分子(例如PD‑1)的结合位点和至少一个特异性结合NRP‑1的结合位点的多特异性抗体。本发明还涉及工程化以表达嵌合抗原受体(CAR)的细胞群，并且其中所述细胞中NRP‑1的表达被抑制。

技术领域

本发明涉及用于增强癌症患者的CD8+T细胞依赖性免疫应答的方法和药物组合物。

背景技术

免疫系统检测和消除癌症的能力在100多年前首次被提出。从那时起，在患有许多不同类型癌症的患者的血液中检测到了对肿瘤相关抗原具有反应性的T细胞，表明免疫系统在抗击癌症中的作用。先天免疫和适应性免疫维持效应细胞，如淋巴细胞和自然杀伤细胞，所述效应细胞将正常细胞与如肿瘤细胞的“修饰”细胞区分开来。然而，大多数情况下，肿瘤细胞能够逃避免疫识别和破坏。肿瘤逃逸的机制有很多，但共抑制分子的免疫抑制作用在过去十年中已经成为反映最具吸引力的一种新的癌症治疗。淋巴细胞的激活实际通过属于B7/CD28超家族(也称为免疫球蛋白(Ig)超家族)和TNF/TNFR超家族的共刺激和共抑制分子来调节。这些信号之间的平衡决定淋巴细胞的激活，从而调节免疫应答。这些共刺激和共抑制分子被称为“免疫检查点”。最近最受关注的免疫检查点是程序性细胞死亡蛋白1(PD-1)。抑制PD-1的单克隆抗体如纳武单抗和派姆单抗确实显示出显著的功效并且已经获得批准，并有望在未来引起轰动。然而，尽管这些药物推动了相当大的进步，但一些患者仍未能响应，因此需要鉴定所述抗性的机制以提供新的治疗选择。

神经毡蛋白-1(NRP-1)是一种跨膜糖蛋白，其作为血管内皮生长因子(VEGF)家族各种成员的共同受体。它结合或调节许多其他细胞外配体(如3类信号素、TGF-β、HGF、FGF和PDGF)活性的能力表明NRP-1参与多种生理和病理过程。实际上，这种共同受体与轴突引导、血管生成、肿瘤进展有关。我们和其他人已经证明Nrp1参与先天免疫和适应性免疫两者，但是从未研究过NRP-1在抗肿瘤细胞毒性T细胞中的影响。

发明概述

如权利要求所定义，本发明涉及用于增强癌症患者的CD8+T细胞依赖性免疫应答的方法和药物组合物。

发明详述

发明人现已证明，NRP-1由细胞毒性T细胞(CD8+T细胞或CTL)表达，共定位并与所述细胞上的PD-1形成复合物。CTL中NRP-1表达的缺失导致动物的抗肿瘤应答更明显。此外，结合CD8+T细胞上的NRP1缺失和动物中的抗PD1抑制剂产生协同的抗肿瘤作用。最后，计算机分析表明，在用抗PD1抑制剂治疗的患者中，患者中NRP-1的下调表达有更好的应答。

主要定义：

如本文所用，术语“T细胞”具有其在本领域的一般含义并且代表在细胞介导的免疫中起核心作用的免疫系统的重要组分。T细胞被称为常规淋巴细胞，因为它们通过主要组织相容性复合物分子的呈递或限制其TCR(抗原的T细胞受体)来识别抗原。存在几个各自具有不同功能的T细胞亚群，诸如CD8+T细胞、CD4+T细胞、γδT细胞和Treg。