[发明专利]稳定的无包膜病毒组合物

说明书

本发明涉及通过层流逆流喷雾干燥工艺获得的热稳定无包膜病毒的方法和组合物。所述组合物包含可气雾化无定形颗粒，所述颗粒包含游离的、无包封的无包膜病毒和赋形剂，其中所述颗粒典型地具有小于5μm的质量中值空气动力学直径(MMAD)并且包含小于5％的水。

技术领域

本发明一般涉及一种热稳定可气雾化干燥无包膜病毒组合物，其包含通过层流喷雾干燥工艺产生的无包膜病毒。

背景技术

疫苗通常在WHO指南推荐的包括冷链的严格控制条件下从制造商分发给用户。对于疫苗和其它生物药剂，在储存和分发期间的稳定性是常见的问题，尤其是当冷链受限或无法进入的偏远地区需要接种疫苗时。出于这个原因，干粉疫苗(DPV)具有吸引力，因为它们潜在地可以更稳定地储存，但需要考虑生产干燥工艺以及随后的包装和递送系统。T.F.Bahamondez-Canas等人在《欧洲制药学与生物制药学杂志(Eur.J.Pharm andBiopharm.)》,2018,第122卷,第167-175页中的文章概述对可鼻内或肺部给药的稳定疫苗的需求，同时回顾提供这类系统的当代努力。它还在G Kanojla等人；《人类疫苗和免疫疗法(Human vaccinesImmunotherapeutics)》,2017,第13(10)卷,第2364-2378页中讨论疫苗喷雾干燥可如何替代冷冻干燥以提供可给药的粉末。然而，还概述影响生物材料活性的应激因素的缺点，显而易见的是需要更好地保持病毒活性并且产生高质量可气雾化粉末配制物的工艺，以便建立可方便地以有效控制剂量按不同给药途径给药的疫苗。WO 2017/035664公开包含葡聚糖和甘露醇的稳定的腺病毒组合物，据报告，其在环境温度储存下保持至少40％的腺病毒活性。然而，据报告，产率相当低并且没有公开是否可形成高质量的可吸入气雾剂而没有重新凝聚的趋势。US 9,839,613公开具有减毒活病毒、非还原糖、氨基酸稳定剂和蛋白质稳定剂的疫苗的干燥配制物。没有报告组合物是否适于形成气雾剂并且维持的活性似乎相当低。US 8,347,525公开用于生产易受药剂影响的微粉化粉末的喷雾干燥设备和方法。然而，没有公开如何配制既可气雾化又热稳定同时在干燥工艺和随后在环境温度下储存后保持有效活性的疫苗或生物产品。US2018161415公开依赖于包含甘露醇和葡聚糖的赋形剂作为在常规喷雾干燥方法期间的保护剂的热稳定干燥腺病毒组合物。然而，显而易见的是使用这些方法仍然获得病毒活性的损失，并且需要新的方法和组合物，以改进呈干燥形式的病毒组合物的稳定性，在环境温度下长期储存的整个过程中也是如此。

病毒一般分为无包膜型和包膜型。两种类型的病毒颗粒都含有包装在称为衣壳的蛋白质外壳中的病毒基因组。包膜病毒被通常包含糖蛋白的外层脂质双层膜包围，而无包膜病毒缺乏这种膜。衣壳和包膜在细胞病毒感染和细胞间病毒基因材料转移的各种机制方面起重要作用。包膜的脆弱性意指这类病毒被认为对温度和其它环境因素的改变更为敏感。然而，无包膜病毒(如腺病毒)的病毒表面结构对构象改变以及与用于配制病毒或病毒部分的不同试剂的相互作用也非常敏感。因此，将期望提供在病毒产品(例如疫苗)的制备和储存期间抵消期望活性的损失或降低的方法和配制物。

发明内容

本发明的一般目的是提供包含无包膜病毒和赋形剂的干燥无包膜病毒组合物，其为热稳定的并且可在至少40℃的温度下储存并且维持有效活性。

本发明的一个目的是提供干燥无包膜病毒组合物，其为可气雾化的并且从而适用作可吸入药物，例如通过肺部沉积，或通过干燥颗粒组合物的质量的影响适合于鼻内给药。

本发明的另一个目的是提供干燥组合物，其包含在不含有助于沉积在病毒表面上、包封病毒或聚集病毒并且从而有助于在干燥工艺和/或随后的储存期间灭活的这类试剂的情况下生产的游离的无包封的无包膜的。

本发明的另一个目的是提供在40℃下获得热稳定性的方法和所得干燥无包膜病毒组合物，而与病毒最初是如何用赋形剂制造和配制的无关。