[发明专利]用于刺激自然杀伤细胞的组合物和方法

权利要求书

1.一种融合蛋白，其包含与Fc结构域的氨基末端连接的跨膜结构域。

2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述跨膜结构域包含选自以下的信号锚定序列：神经氨酸酶的跨膜结构域、来自副流感病毒血凝素-神经氨酸酶的信号锚、来自转铁蛋白受体的信号锚、来自II类MHC不变链的信号锚、来自P糖蛋白的信号锚、来自脱唾液酸糖蛋白受体的信号锚和来自中性内肽酶的信号锚。

3.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述跨膜结构域包含副流感病毒血凝素-神经氨酸酶(NA)肽序列。

4.根据权利要求3所述的融合蛋白，其中所述副流感病毒血凝素-神经氨酸酶(NA)肽序列包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:17具有至少约81％序列一致性的序列。

5.根据权利要求4所述的融合蛋白，其中所述副流感病毒血凝素-神经氨酸酶(NA)肽序列包含与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:17具有至少约95％序列一致性的序列。

6.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述Fc结构域包含选自IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgA和IgE的免疫球蛋白Fc结构域。

7.根据权利要求1所述的融合蛋白，其进一步包含在所述跨膜结构域与所述Fc结构域之间的肽接头。

8.一种核酸，其编码根据权利要求1至7中任一项所述的融合蛋白。

9.一种载体，其包含根据权利要求8所述的核酸。

10.一种细胞，其包含根据权利要求9所述的载体。

11.一种工程化细胞质膜(PM)颗粒或外泌体，其包含根据权利要求1至7中任一项所述的融合蛋白。

12.一种NK细胞扩增组合物，其包含与饲养细胞、工程化PM颗粒或外泌体的外表面结合的膜结合反向Fc结构域。

13.根据权利要求12所述的NK细胞扩增组合物，其包含基本上不含饲养细胞的工程化PM颗粒或工程化外泌体。

14.根据权利要求13所述的NK细胞扩增组合物，其中所述工程化颗粒进一步包含至少一种NK细胞效应剂。

15.根据权利要求12所述的NK细胞扩增组合物，其进一步包含至少一种NK细胞效应剂。

16.根据权利要求14或15所述的NK细胞扩增组合物，其中所述至少一种NK细胞效应剂是IL-21或IL-15。

17.根据权利要求16所述的NK细胞扩增组合物，其进一步包含第二NK细胞效应剂，其中所述第二NK细胞效应剂是41BBL。

18.根据权利要求12所述的NK细胞扩增组合物，其中所述工程化PM颗粒包含从被融合蛋白转染或转导的NK细胞饲养细胞纯化的细胞质膜囊泡以及所述至少一种NK细胞效应剂，所述融合蛋白包含与Fc结构域连接的跨膜结构域。

19.根据权利要求12所述的NK细胞扩增组合物，其中所述工程化PM颗粒包含从被融合蛋白转染的NK细胞饲养细胞衍生的外泌体以及所述至少一种NK细胞效应剂，所述融合蛋白包含与Fc结构域连接的跨膜结构域。