[发明专利]重组蛋白的制备方法在审
| 申请号： | 202080011556.4 | 申请日： | 2020-01-30 |
| 公开（公告）号： | CN113439087A | 公开（公告）日： | 2021-09-24 |
| 发明（设计）人： | 中东宪治;蒋李;野田昂文;津山研二 | 申请（专利权）人： | 丝芭博株式会社 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 吕琳;朴秀玉 |
| 地址： | 日本山形*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 蛋白 制备 方法 | ||
1.一种重组蛋白的制备方法，其具备：增殖降低工序，其用于降低表达重组蛋白的重组细胞的细胞增殖；
以及生产工序，其用于在降低细胞增殖的状态下，在蛋白质生产培养基中培养所述重组细胞以生产所述重组蛋白；
其中，在所述增殖降低工序中，通过使用包含至少一个改造后的形态形成控制因子在内的重组细胞作为所述重组细胞，来降低所述重组细胞的细胞增殖。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述改造后的形态形成控制因子是突变型细胞骨架蛋白。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其中，所述突变型细胞骨架蛋白是突变型MreB。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其中，所述突变型形态形成控制因子包含与MreB具有至少90％的序列一致性的氨基酸序列。
5.根据权利要求3或4所述的制备方法，其中，所述突变型形态形成控制因子在MreB的第53个氨基酸残基丙氨酸中具有突变。
6.根据权利要求3～5中任一项所述的制备方法，其中，所述突变型形态形成控制因子具有MreB的第53个氨基酸残基丙氨酸被苏氨酸取代的突变。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其中，所述重组细胞是导入了用于控制细胞骨架蛋白功能的蛋白质的表达盒的细胞。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，控制所述细胞骨架蛋白功能的蛋白质为sulA。
9.根据权利要求1～8中任一项所述的制备方法，其中，所述蛋白质生产培养基包含天然来源成分。
10.根据权利要求1～9中任一项所述的制备方法，其中，所述重组蛋白的疏水性为-1.0以上。
11.根据权利要求1～10中任一项所述的制备方法，其中，所述重组蛋白为结构蛋白质。
12.根据权利要求1～11中任一项所述的制备方法，其中，所述重组蛋白为丝心蛋白。
13.根据权利要求1～12中任一项所述的制备方法，其中，所述重组蛋白为蜘蛛丝丝心蛋白。
14.根据权利要求1～13中任一项所述的制备方法，其中，所述重组细胞为杆菌。
15.根据权利要求1～14中任一项所述的制备方法，其中，所述重组细胞为属于埃希氏菌属的微生物。
16.一种增加每个细胞的重组蛋白的生产量的方法，该方法包括：
增殖降低工序，其用于降低表达重组蛋白的重组细胞的细胞增殖；
以及生产工序，其用于在降低细胞增殖的状态下，在蛋白质生产培养基中培养所述重组细胞以生产所述重组蛋白；
其中，在所述增殖降低工序中，通过使用包含至少一个改造后的形态形成控制因子在内的重组细胞作为所述重组细胞，来降低所述重组细胞的细胞增殖。
17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述改造后的形态形成控制因子是突变型细胞骨架蛋白。
18.根据权利要求16所述的方法，其中，所述重组细胞是导入了用于控制细胞骨架蛋白功能的蛋白质的表达盒的细胞。
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