[发明专利]用于溶酶体贮积症的经鼻基因递送和口服肉桂酸、油酰胺或吉非贝齐的组合

说明书

本文提供了用于治疗溶酶体贮积症的方法，包括给药编码溶酶体酶的基因和药剂。通过共同给药将基因疗法与药物组合物组合，不仅进一步增强了每种单独疗法的效果，而且由于每种单独组合物的作用机制不同，还提供了多方面的治疗方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求2019年3月22日提交的美国临时专利申请第62/822,310号的优先权，其通过引用全文纳入本文。

技术领域

本发明涉及将编码溶酶体酶的基因与用于治疗溶酶体贮积症(例如晚期婴儿巴顿病和克拉伯病)的药剂组合给药的方法。

背景

溶酶体是包含多种酶的膜结合细胞器，这些酶负责脂质、蛋白质、碳水化合物和核酸的降解(De Duve和Wattiaux，1966)。几乎任何这些成分的缺陷和缺损都会导致未消化和/或部分消化的物质在溶酶体中积累，从而形成许多溶酶体贮积症(LSD)的基础(De Duve和Wattiaux，1966，Perez-Sala等，2009)，包括巴顿病(婴儿、晚期婴儿和青少年神经元蜡样脂褐质沉积症)，克拉伯病和泰-萨二氏病。

神经元蜡样脂褐质沉积症(NCL)是一组神经退行性疾病，主要由典型的常染色体隐性遗传溶酶体贮积症组成。NCL的特征可包括临床表现，如进行性精神衰退、认知障碍、视力障碍、癫痫发作和运动功能恶化，并伴有组织学发现，如神经元或其他细胞类型中自发荧光贮积材料的积累(Hachiya等，2006)。根据发病年龄、累积贮积材料中的超微结构变化和每种特定疾病类型特有的遗传改变，NCL被细分为几组(1类-10类)(Lane等，1996和Mole等，2005)。

婴儿神经元蜡样脂褐质沉积症(INCL)在大约18个月大的儿童中出现，其症状包括失明、认知缺陷、癫痫发作和早夭(Hawkins-Salsbury等，2013)。编码溶酶体酶棕榈酰蛋白硫酯酶-1(PPT1)的clnl基因的缺陷导致各种自发荧光材料基质(例如脂褐质)在中枢神经系统和组织中积累(同上)。随后发生的神经元变性、皮质变薄和脑萎缩导致与未受影响的儿童相比脑质量减少约50％(同上)。目前没有可用的治疗方法。

晚期婴儿神经元蜡样脂褐质沉积症(詹-比二氏病(Jansky-Bielschowskydisease)，LINCL，2型)通常在2-4岁出现症状，进展迅速并在8-15岁死亡，这是由于神经元和其他细胞数目急剧减少(Lane等，1996和Sleat等，1997)。LINCL与cln2基因突变有关，该基因总长度为6.65kb，13个外显子和12个内含子，定位到染色体1 1p15.5。cln2基因编码溶酶体三肽基三肽酶I(TPP-I或胃蛋白酶不敏感蛋白酶)，一种46KD的蛋白质，其在溶酶体隔室的酸性环境中发挥作用，以从蛋白质的氨基末端去除三肽(Goebel 1995和Vines等，1999)。在cln2基因的该突变导致TPP1蛋白质的功能缺陷和/或丧失，这导致溶酶体内积累称为蜡样-脂褐质的自发荧光脂色素(Goebel，1995)。目前没有针对这种疾病的可用既定治疗或药物，所有方法只是支持性的或对症的，表明需要新的治疗方法(Chang et al.，2008)。然而，cln2突变有不同变体，且有报道称在LINCL患者中发现了残余TPP-I活性，这表明在患有LINCL的患者中一定有一些剩余的正常cln2基因的拷贝(Viglio等，2001和Walus等，2010)。

另一种NCL是青少年巴顿病(青少年婴儿神经元蜡样脂褐质沉积症(JINCL))。cln3基因编码可能与突触功能或退化有关的溶酶体跨膜蛋白(Dolisca等，2013)。与JINCL相关的cln3的突变特征为1.01kb缺失。与其他NCL的(特征)一样，JINCL的发病发生在4-7岁的儿童中，症状包括逐渐失明、运动和认知退化、癫痫发作和早天。

克拉伯病是罕见的溶酶体贮积疾病，是基于髓鞘退化的鞘脂沉积病的结果。该疾病是由β-半乳糖脑苷酯酶溶酶体贮积酶的突变导致的，从而积累细胞毒性代谢产物并破坏多种代谢途径，导致脱髓鞘。克拉伯病可以是婴儿型、晚期婴儿型、青少年型甚至成人型(Pavuluri等，2017)。