[发明专利]使用卡西莫森治疗肌营养不良的方法

说明书

本公开尤其提供了用于治疗肌营养不良的改进的组合物和方法。例如，本公开提供了用于通过施用有效量的卡西莫森来治疗杜氏肌营养不良患者的方法，所述患者具有适合于外显子45跳跃的DMD基因突变。

相关申请

本申请要求2019年3月28日提交的美国临时申请号62/825,573和2019年9月19日提交的美国临时申请号62/902,518的权益。上述申请的全部教导以全文引用的方式并入。

技术领域

本发明涉及用于治疗患者的肌营养不良的改进的方法。它还提供了适用于促进人肌营养不良蛋白基因中的外显子45跳跃的组合物。

背景技术

在各种遗传疾病中，基因突变对基因最终表达的影响可以通过剪接过程中的靶向外显子跳跃过程来调节。在正常功能蛋白因其中的突变而过早终止的情况下，通过反义技术恢复一些功能蛋白产生的手段已经被证明是可以通过在剪接过程中进行干预的，如果可以从一些基因中特异性地删除与致病突变相关的外显子，有时可以产生缩短的蛋白产物，该产物具有与天然蛋白相似的生物学特性，或者具有足够的生物学活性，以改善与外显子相关的突变所引起的疾病(参见例如Sierakowska,Sambade等人1996；Wilton,Lloyd等人1999；van Deutekom,Bremmer-Bout等人2001；Lu,Mann等人2003；Aartsma-Rus,Janson等人2004)。

杜氏肌营养不良(DMD)是由蛋白质肌营养不良蛋白的表达的缺陷引起的。肌营养不良蛋白是杆状细胞质蛋白，并且是通过细胞膜将肌肉纤维的细胞骨架连接到周围的细胞外基质的蛋白质复合物的重要部分。肌营养不良蛋白在肌肉纤维中起着重要的结构作用，连接细胞外基质和细胞骨架。N端区域结合肌动蛋白，而C端是跨越肌膜的肌营养不良蛋白糖蛋白复合物(DGC)的一部分。已经显示，mdx小鼠的肌营养不良蛋白缺乏的肌肉纤维表现出对收缩诱导的肌膜破裂的敏感性增加(参见Petrof等人1993；Cirak等人2012)。

编码肌营养不良蛋白的基因含有79个分布在超过200万个DNA核苷酸上的外显子。任何改变外显子阅读框、或引入终止密码子、或特征在于去除整个框外一个或多个外显子或一个或多个外显子重复的外显子突变都可能破坏功能性肌营养不良蛋白的产生，从而导致DMD。

疾病发作可以在出生时记录，肌酸激酶水平升高，并且在一岁时可能存在显著的运动缺陷。到七岁或八岁时，大多数DMD患者都存在越来越紧张的步态，并且正在丧失从地面上站起和爬楼梯的能力；到10岁至14岁时，大多数都是依赖轮椅的。DMD是一致致命的；受影响的个体通常在其青少年晚期或20岁早期死于呼吸和/或心力衰竭。DMD的持续进展允许在疾病的所有阶段进行治疗干预；然而，直到最近，治疗仅限于糖皮质激素，这与许多副作用相关，包括增重、行为改变、青春期变化、骨质疏松症、库欣氏样面容(Cushingoidfacies)、生长抑制和白内障。因此，开发更好的疗法以治疗这种疾病的根本原因是当务之急。

已发现一种不太严重的肌营养不良形式，即贝克尔肌营养不良(BMD)，其中突变(通常是一个或多个外显子的缺失)导致沿整个肌营养不良蛋白转录物的正确阅读框，从而使mRNA翻译成蛋白质的过程不会过早终止。如果在处理突变的肌营养不良蛋白前体mRNA时，上游和下游外显子的接合保持了基因的正确阅读框，其结果是编码蛋白质的mRNA具有短的内部缺失，但保留了一些活性，从而产生了贝克尔表型。

多年来，已知不改变肌营养不良蛋白阅读框的一个或多个外显子的缺失会引起BMD表型，而引起移码的外显子缺失会引起DMD(Monaco,Bertelson等人1988)。一般来说，肌营养不良蛋白突变包括点突变和外显子缺失，这些突变改变了阅读框，从而中断了正确的蛋白质翻译，导致DMD。还应注意的是，一些BMD和DMD患者的外显子缺失覆盖多个外显子。