[发明专利]用于晚期婴儿神经元蜡样脂褐质沉积症2型的AAV载体治疗方法

说明书

本文公开了用于治疗需要三肽基肽酶1(TPP1)的灵长类动物的方法，该方法包括(a)提供包含编码TPP1的核酸的重组腺相关病毒(AAV)载体；以及(b)向灵长类动物的中枢神经系统(CNS)施用一定量的重组AAV载体，其中TPP1在灵长类动物中表达。

相关申请

本专利申请要求于2019年2月1日提交的美国临时专利申请号62/800,131的优先权。前述申请的包括所有正文、表格、附图和序列在内的全部内容通过引用并入本文。

背景技术

晚期婴儿神经元蜡样脂褐质沉积症2(CLN2)，也称为Jansky-Bielschowsky病和晚期婴儿NCL(LINCL)，是一种出现在约2至4岁左右的儿童中的进行性神经变性疾病。症状包括癫痫发作、运动控制和视力丧失、认知和发育障碍，最终在生命的头20年内死亡。潜在的病理机制是由于相应基因的突变导致可溶性溶酶体酶三肽基肽酶-1(TPP1)的缺乏或缺陷。

报告表明，内衬于大脑侧脑室的室管膜细胞的腺相关病毒(AAV)载体转导可以使得人TPP1连续分泌到脑脊液(CSF)中，由此将表达的TPP1蛋白递送到整个中枢神经系统(Martz,L.,Biocentury Innovation,2015年12月10日)。据报道，在CLN2的犬模型中经由室管膜转导递送AAV2-CAG-TPP1可提供疾病改良并延长生命(Katz,M.L.,等人(2015).SciTransl Med,7(313))。

发明内容

本文公开了评估AAV2-CAG-人TPP1载体的安全性和耐受性的非人灵长类动物研究。通过单侧注射到侧脑室中为AAV载体递送范围从1E13到2.17E14载体基因组/大脑的3个剂量，然后进行5周和20周的观察。监测每只动物与基线相比TPP1活性和CSF中抗原水平的变化。与基线相比，TPP1活性水平显示出了从低剂量队列的～17倍到高剂量队列的～48倍的峰值增加。此外，在整个研究期间，所有测试剂量的平均hTPP1转基因表达水平都超过了TPP1的K_uptake范围。对相关中枢神经系统(CNS)组织的初步分析已确定没有与载体传递或TPP1转基因表达相关的病理变化。总之，在非人灵长类动物中利用AAV2载体进行室管膜转导后人TPP1的表达具有良好的耐受性，提供维持的CSF TPP1蛋白表达，其一直在约60至约120ng/mL的K_uptake值内或超过该值，足以为具有CLN2的动物提供治疗影响。

在某些实施方案中，一种治疗需要三肽基肽酶1(TPP1)的灵长类动物的方法，该方法包括(a)提供重组腺相关病毒(AAV)载体，该载体包含编码TPP1的核酸；以及(b)向灵长类动物的中枢神经系统(CNS)施用一定量的重组AAV载体，其中TPP1在灵长类动物中表达。

在某些实施方案中，灵长类动物是人类。在某些实施方案中，该人类患有晚期婴儿神经元蜡样脂褐质沉积症(CLN2)。在某些实施方案中，该人类约1-10岁或大于10岁。在某些实施方案中，该人类约2-5岁。

在某些实施方案中，在治疗灵长类动物的方法中，将重组AAV载体施用于侧脑室或脑池(cisternae magna)。在某些实施方案中，将重组AAV载体施用于侧脑室的枕角(occipital horn)。在某些实施方案中，将重组AAV载体单侧施用于一个侧脑室。在某些实施方案中，将重组AAV载体双侧施用于每个侧脑室。在某些实施方案中，将重组AAV载体多次单侧或双侧施用于侧脑室的一侧或两侧。

在某些实施方案中，TPP1在CNS中以增加的水平表达。在某些实施方案中，TPP1在整个CNS中表达或递送。在某些实施方案中，TPP1在室管膜细胞中表达或递送至室管膜细胞。在某些实施例中，TPP1被递送至实质(parenchyma)。