[发明专利]在流通池中的固定

权利要求书

1.一种方法，包括：

将靶材料固定在流通池的两个相对的测序表面中的每个测序表面处，其中所述固定涉及：

将其中包含所述靶材料的第一部分的第一流体引入所述流通池中，由此所述靶材料中的至少一些靶材料被所述两个相对的测序表面中的一个测序表面上的捕获位点固定；

从所述流通池中移除所述第一流体和任何未固定的靶材料；以及

将其中包含所述靶材料的第二部分的第二流体引入所述流通池中，由此所述靶材料中的至少一些靶材料被所述两个相对的测序表面中的另一个测序表面上的捕获位点固定；

其中二者择一：

所述第一流体的密度小于所述靶材料的密度，并且所述第二流体的密度大于所述靶材料的所述密度；或者

所述第二流体的密度小于所述靶材料的密度，并且所述第一流体的密度大于所述靶材料的所述密度。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述密度小于所述靶材料的所述密度的所述第一流体或所述第二流体为含水缓冲溶液，并且其中所述密度大于所述靶材料的所述密度的所述第二流体或所述第一流体为多钨酸钠溶液或氯化钠溶液。

3.根据权利要求1或2中的一项所述的方法，其中所述第一流体或所述第二流体在捕获温度下的所述密度比所述靶材料在所述捕获温度下的所述密度低至少0.1g/cm³，并且其中所述第二流体或所述第一流体在所述捕获温度下的所述密度比所述靶材料在所述捕获温度下的所述密度高至少0.1g/cm³。

4.根据权利要求1或2中的一项所述的方法，其中在捕获温度下小于所述靶材料的所述密度的所述第一流体或所述第二流体的所述密度为约1g/cm³，并且其中在所述捕获温度下大于所述靶材料的所述密度的所述第二流体或所述第一流体的所述密度为约2g/cm³。

5.根据权利要求1至4中的一项所述的方法，所述方法还包括在从所述流通池中移除所述第一流体和任何未固定的靶材料之前允许经过预先确定的时间。

6.根据权利要求1至5中的一项所述的方法，其中当引入所述第二流体时，固定在所述两个相对的测序表面中的所述一个测序表面上的所述靶材料保持固定在所述两个相对的测序表面中的所述一个测序表面上。

7.根据权利要求1至6中的一项所述的方法，其中所述靶材料为复合物，所述复合物包括：

固体支持物；和

附接到所述固体支持物的测序就绪核酸片段。

8.根据权利要求7所述的方法，所述方法还包括：

从所述流通池中移除所述第二液体和未固定的复合物；

引发所述测序就绪核酸片段从固定的复合物的所述固体支持物的释放，从而将至少一些所述测序就绪核酸片段接种到所述两个相对的测序表面的相应引物；

移除所述固体支持物和未接种的测序就绪核酸片段；

将含有液体形式的温度响应材料的扩增混合物引入所述流通池中；

使所述液体形式的所述温度响应材料胶凝；

引发所述已接种的测序就绪核酸片段的扩增以生成模板链，由此所述凝胶形式的所述温度响应材料减少所述模板链的扩散；

使所述凝胶形式的所述温度响应材料液化；以及

从所述流通池中移除所述液体形式的所述温度响应材料。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述温度响应材料为聚(N-异丙基丙烯酰胺)和聚乙二醇的共聚物。

10.根据权利要求1所述的方法，其中所述靶材料为成簇固体支持物，所述成簇固体支持物包括：

固体支持物；和

模板链的簇，所述模板链的簇附接到所述固体支持物。