[发明专利]用于在免疫测定中重复使用半抗原涂覆的探针的方法

权利要求书

1.一种检测多个液体样品中的分析物的方法，所述多个液体样品包括分析物，所述方法包括以下步骤：

(a)将探针浸渍在pH为6.0-8.5的水性溶液中以预读探针尖端的荧光信号，其中所述探针包括固定在所述探针的尖端上的半抗原，并且尖端表面的直径≤5mm；

(b)在所述探针尖端上形成包括来自样品的所述分析物、捕获抗体和信号抗体的免疫复合物，其中所述捕获抗体和所述信号抗体是针对所述分析物的两种不同抗体，所述捕获抗体与针对所述半抗原的抗半抗原抗体共价连接，并且所述信号抗体与荧光标记物缀合；

(c)将所述探针尖端浸渍到含有洗涤溶液的洗涤容器中；

(d)通过测量所述探针尖端处的所述免疫复合物的荧光信号、减去(a)的预读的荧光信号并且针对校准曲线对减去后的信号进行定量来确定所述样品中的分析物浓度；

(e)将所述探针尖端浸渍在pH为约1.0-4.0的酸性溶液中以从所述探针尖端洗脱所述免疫复合物；以及

(f)重复步骤(a)-(e)，但在步骤(b)中使用来自新样品的所述分析物，由此所述多个液体样品中的每个液体样品中的所述分析物得以检测。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(b)的所述免疫复合物通过以下形成：

(b1)将样品溶液与双抗体溶液和试剂溶液混合以形成混合物，其中所述样品溶液包括所述分析物，所述双抗体溶液包括与所述捕获抗体共价连接的所述抗半抗原抗体，并且所述试剂溶液包括与荧光标记物缀合的所述信号抗体；以及

(b2)将所述探针尖端浸渍在所述混合物中，以在所述探针尖端上形成所述免疫复合物。

3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤(b)的所述免疫复合物通过以下形成：

(b1)将所述探针尖端浸渍在双抗体溶液中，所述双抗体溶液包括与所述捕获抗体共价连接的所述抗半抗原抗体；

(b2)将所述探针尖端浸渍在包括所述样品的样品溶液中；

(b3)将所述探针尖端浸渍在包括与荧光标记物缀合的所述信号抗体的试剂溶液中，以在所述探针尖端上形成所述免疫复合物。

4.根据权利要求1、2或3所述的方法，其中步骤(e)中的所述酸性溶液的pH为1.5-2.5。

5.根据权利要求1、2或3所述的方法，其中在步骤(e)中，将所述探针尖端暴露于所述酸性溶液一次，持续10秒到2分钟。

6.根据权利要求1、2或3所述的方法，其中在步骤(e)中，将所述探针尖端暴露于具有2-5个循环的酸性溶液处理的脉冲处理，之后在读取容器中进行中和持续10-20秒。

7.根据权利要求1、2或3所述的方法，其中所述半抗原是荧光素、洋地黄毒苷或生物素。