[发明专利]宿主细胞蛋白质的鉴定

权利要求书

1.一种用于鉴定具有所关注蛋白质的样品基质中的宿主细胞蛋白质的方法，其包括：

从所述所关注蛋白质解离所述宿主细胞蛋白质；

使用分子量截止过滤器过滤所解离的宿主细胞蛋白质；

使所过滤的宿主细胞蛋白质与水解剂接触；以及

鉴定所述宿主细胞蛋白质。

2.如权利要求1所述的方法，其中使用蛋白质解离剂进行蛋白质解离。

3.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括使所过滤的宿主细胞蛋白质与蛋白还原剂接触。

4.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括使所过滤的宿主细胞蛋白质与蛋白烷基化剂接触。

5.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括对所过滤的宿主细胞蛋白质进行离心。

6.如权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括以约13000rpm将所述宿主细胞蛋白质离心约8分钟。

7.如权利要求1所述的方法，其中所述所关注蛋白是抗体。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述所关注蛋白是治疗性抗体。

9.如权利要求1所述的方法，其中使用质谱仪进行步骤(c)的所述宿主细胞蛋白质的鉴定。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述质谱仪耦合到液相色谱系统。

11.如权利要求10所述的方法，其中所述液相色谱系统是纳米液相色谱系统。

12.如权利要求9所述的方法，其中所述质谱仪是串联质谱仪。

13.如权利要求2所述的方法，其中所述蛋白解离剂包括脱氧胆酸钠。

14.如权利要求2所述的方法，其中所述蛋白解离剂包括N-月桂酰肌氨酸。

15.如权利要求1所述的方法，其中所述蛋白水解剂是胰蛋白酶。

16.如权利要求3所述的方法，其中所述蛋白还原剂是TCEP。

17.如权利要求4所述的方法，其中所述蛋白烷基化剂是CAA。

18.如权利要求1所述的方法，其中所述分子量截止过滤器的截止值为约100KDa。

19.如权利要求1所述的方法，其中所述分子量截止过滤器的截止值为约50KDa。

20.如权利要求1所述的方法，其中所述蛋白解离剂是可降解的。

21.如权利要求1所述的方法，其中所述宿主细胞蛋白质的检测限为至少约1ppm。

22.如权利要求1所述的方法，其中所述过滤步骤使解离的宿主细胞蛋白质富集至少约50倍。

23.如权利要求1所述的方法，其中宿主细胞蛋白质的检测限为不包括使用分子量截止过滤器过滤所解离的宿主细胞蛋白质的步骤的另一种方法的检测限的至少约5倍。

24.一种用于鉴定具有所关注蛋白质的样品基质中的宿主细胞蛋白质的方法，其包括：

从所述所关注蛋白质解离所述宿主细胞蛋白质；

使用分子量截止过滤器过滤所解离的宿主细胞蛋白质；

以及

鉴定所述宿主细胞蛋白质。