[发明专利]用于鉴定黑果越橘的方法和试剂盒

权利要求书

1.一种鉴定植物组合物中的黑果越橘的方法，包括通过PCR扩增从其样品检测黑果越橘核酸片段，所述核酸片段位于内部转录间隔子1、5.8S核糖体RNA基因组区和内部转录间隔子2中，所述方法包括以下步骤：

(a)从所述样品中分离核酸；

(b)在分离的核酸上进行实时PCR，其中使用：

-选自以下的引物组:

(i)SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6；

(ii)SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8；

(iii)SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10；

(iv)SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12；

和

-在引物扩增的核酸区域内退火的探针，所述探针由序列SEQ ID NO:13组成；

(c)确定扩增产物的存在,

其中，检测到扩增产物表明植物组合物中存在黑果越橘。

2.权利要求1的方法，其中引物组(i)用于步骤(b)。

3.权利要求1-2的方法，其中所述rt-PCR在以下条件进行：

-初始变性步骤95℃180秒；

-95℃15秒(第一步)和62-68.5℃15秒(第二步)的两步骤循环，重复四十(40)至五十(50)次。

4.权利要求1-3的方法，其中植物组合物是植物提取物。

5.用于在植物组合物中鉴定黑果越橘的试剂盒，其包含权利要求1中定义的引物组合探针。

6.权利要求5的试剂盒，还包含DNA聚合酶、脱氧核苷酸(dNTP)混合物、缓冲溶液。

7.权利要求5-6的试剂盒，还在分开的容器中包含黑果越橘核酸样品作为阳性对照和无核酸酶的水或缓冲溶液作为阴性对照。