[发明专利]化学手术刀

说明书

本发明涉及一种液体胶原酶溶液，该胶原酶溶液将通过用预定浓度的所述溶液洗涤预定时间来产生对覆盖腹膜肿瘤的组织的预调理，用作治疗腹膜实体瘤的细胞毒性药物增强或辅助治疗。在整个本发明中，所述溶液将用于以一定的浓度和时间直接施用于肿瘤或灌洗肿瘤，以使得引起覆盖肠道的间皮层变薄，而不累及中间层或内层。

技术领域

本发明涉及医学领域，特别涉及一种在溶液中包含胶原酶的组合物，该组合物用作实体瘤治疗中的细胞毒性药物增强或辅助治疗。

背景技术

本发明主要用于改善腹膜癌病(peritoneal carcinomatosis)治疗的临床结果。腹膜内化疗是治疗大多数晚期癌症的最佳方法。为了在无病间隔期和生存期方面获得良好的结果，必须通过复杂的外科手术实现完全的细胞减灭术(切除所有癌性肿块)。然而，外科医生可能无法检测到手术后可能形成的微小肿瘤植入物。有时，微小肿瘤植入物位于非常难以接近和检测的位置。此外，这些微小植入物通常会被腹膜间皮细胞层覆盖，这可能会使无法有效到达肿瘤块的化疗无效。

本发明通过提出一种在溶液中包含胶原酶的组合物来解决该问题，该组合物用作实体瘤治疗中的细胞毒性药物增强或辅助治疗。

附图说明

图1.从源自患者活组织检查的肿瘤组织中获得的细胞在体外培养并在96小时时用胶原酶处理。A)在培养皿上的植入物样本；B)当组织消化30分钟时胶原酶释放的间皮细胞的示例；C)当组织用胶原酶消化24小时时释放的细胞的示例，观察到具有肿瘤形态的细胞和高折射率的间皮细胞的释放(细胞从培养皿上脱离并可能死亡的迹象)；

图2.腹膜癌病动物模型(大鼠)的示例。在动物的腹腔中观察到各种肿瘤结节；

图3.在腹膜癌病动物模型中用胶原酶处理的总图。使动物处于麻醉后，将含有播散性肿瘤块的腹膜腔暴露出来，用胶原酶进行洗涤直到腔充满，然后以受控的速率和温度使含有胶原酶的溶液再循环，最后除去溶液，用林格氏(Ringer’s)乳酸盐溶液洗涤腹膜，对腹膜进行分析，然后再次关闭动物腹部进行随访；

图4.在对腹膜癌病动物模型中腹膜洗涤中的胶原酶浓度和暴露时间进行微调的测试期间，通过苏木精和伊红染色进行组织学样本分析。从图中可以看出，仅在大鼠3和大鼠5(分别为35U/mL和87.5U/mL)的情况下观察到肠切片中脱落细胞的增加；然而，肠道的内层(粘膜下层、粘膜和上皮)完全不受影响，尽管87.5U/mL的浓度确实会局部破坏粘膜下层而不影响隐窝；在来自第2组和第4组(8.75U/mL和林格氏乳酸盐溶液)的大鼠的情况下，在低酶浓度下的与腹膜洗涤相关的外部肌肉层脱落几乎不存在，表明在这些浓度和选定的时间下没有造成不良影响；

图5.在腹膜癌病动物模型中测试时不同处理组的尸体剖检：

5.A.来自丝裂霉素5mg处理组的健康大鼠在1周随访后的尸体剖检的示例。作为主要发现，观察到所有腹部器官处于放松和收缩状态(肾脏出现坏死以及肝脏出现塌陷)，网膜一接触就会破裂，并且大肠梗阻；

5.B.来自丝裂霉素0.1mg处理组的健康大鼠在2个月随访后的尸体剖检的示例。作为主要发现，观察到肠和网膜带血；

5.C.用74U/mL胶原酶处理并在2个月后处死的健康大鼠的尸体剖检的示例。没有累及腹部器官和网膜可被视为主要发现；

5.D.来自胶原酶37U/mL+丝裂霉素0.5mg处理组的腹膜癌大鼠在1周随访后的尸体剖检的示例。作为主要发现，可以观察到器官保存完好，并且网膜看起来正常；

5.E.来自DHD处理组的腹膜癌大鼠在1个月随访后的尸体剖检的示例。在腹水肠(ascitic intestine)中可以看到与网膜和腹壁相关的若干肿瘤块；

5F.腹膜癌加胶原酶的示例。F组在进行微调时进行分析，结果与E组相似(参见表3)。