[发明专利]制备铼螯合MAG3寡核苷酸的新方法

权利要求书

1.一种制备式(III)化合物的方法，所述方法包括以下步骤：

a)使式(I)化合物：

其中R为H或硫醇保护基，

与铼络合物的前体在溶剂中反应，得到式(II)化合物：

b)添加N-羟基琥珀酰亚胺和偶联剂，得到式(III)化合物：

其中步骤a)和b)在一锅法反应中进行。

2.根据权利要求1所述的方法，所述方法进一步包括步骤c)：添加氨基寡核苷酸和碱以得到式(IV)化合物：

3.根据权利要求2所述的方法，其中步骤a)、b)和c)在一锅法反应中进行。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述铼络合物的前体选自由以下所组成的组：ReOCl₃(PPh₃)₂、Re(NPh)Cl₃(PPh₃)₂、ReO₂(PPh₃)₂I和Re(NPh)Cl₃(PPh₃)₂。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述铼络合物的前体是ReOCl₃(PPh₃)₂。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中R是选自由以下所组成的组的硫醇保护基：乙酰基(Ac)、苯甲酰基(Bz)、苄基(Bn)、β-甲氧基乙氧基甲基醚(MEM)、二甲氧基三苯甲基(或双-(4-甲氧基苯基)苯基甲基)(DMT)、三甲氧基三苯甲基(或三-(4-甲氧基苯基)苯基甲基)(TMT)、甲氧基甲基醚(MOM)、甲氧基三苯甲基[(4-甲氧基苯基)二苯基甲基(MMT)、对甲氧基苄基醚(PMB)、甲硫基甲基醚、新戊酰(Piv)、四氢吡喃基(THP)、四氢呋喃(THF)、三苯甲基或三苯基甲基(Tr)、甲硅烷基醚(例如三甲基甲硅烷基(TMS)、叔丁基二甲基甲硅烷基(TBDMS)、三异丙基甲硅烷基氧基甲基(TOM)和三异丙基甲硅烷基(TIPS)醚)以及甲基醚和乙氧基乙基醚(EE)。

7.根据权利要求6所述的方法，其中R是选自由乙酰基(Ac)和苯甲酰基(Bz)所组成的组的硫醇保护基。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中步骤a)中的所述溶剂是极性非质子溶剂和极性质子溶剂的混合物。

9.根据权利要求8所述的方法，其中DMF:MeOH的体积比为约1:1。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中在步骤a)中进一步使用碱。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述的碱是NaOMe。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法，所述方法包括以下步骤：

a)使式(I)化合物：

其中R是H、选自由乙酰基(Ac)和苯甲酰基(Bz)所组成的组的硫醇保护基，

与ReOCl₃(PPh₃)₂，

在体积比为约1:1的DMF:MeOH中反应，得到式(II)化合物：

b)添加N-羟基琥珀酰亚胺和EDC-HCl，得到式(III)化合物：

c)添加氨基寡核苷酸和碱，得到式(IV)化合物：

其中所述寡核苷酸包含至少一种2’糖修饰的核苷或LNA核苷，且步骤a)、b)和c)是在一锅法反应中进行的。