[发明专利]双链核酸的原位检测及其相关方法在审
申请号: | 202080033656.7 | 申请日: | 2020-03-11 |
公开(公告)号: | CN113795592A | 公开(公告)日: | 2021-12-14 |
发明(设计)人: | X-J.马;F.汤德内维斯;C.托德罗夫;B.张 | 申请(专利权)人: | 领先细胞医疗诊断有限公司 |
主分类号: | C12Q1/682 | 分类号: | C12Q1/682;C12Q1/6837;C12Q1/6876 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 张文辉 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 原位 检测 及其 相关 方法 | ||
1.一种检测双链核酸的方法,所述方法包括:
(A)使包含含有一种或多种双链核酸的细胞的样品与靶探针组接触,其中所述靶探针组包含一对靶探针,所述一对靶探针包含与靶双链核酸的第一链特异性地杂交的第一探针和与所述双链核酸的第二链特异性地杂交的第二探针;
(B)使所述样品与前置扩增子接触,所述前置扩增子包含用于所述第一靶探针的结合位点、用于所述第二靶探针的结合位点和用于扩增子的多个结合位点;
(C)使所述样品与多个扩增子接触,其中所述扩增子包含用于所述前置扩增子的结合位点和用于标记探针的多个结合位点;
(D)使所述样品与多个标记探针接触,其中所述标记探针包含标记和用于所述扩增子的结合位点;以及
(E)检测与所述靶双链核酸结合的所述标记探针,从而检测所述靶双链核酸。
2.如权利要求1所述的方法,其中所述靶探针组包含两对或更多对与相同靶核酸特异性地杂交的靶探针。
3.如权利要求1或2所述的方法,其中所述双链核酸是DNA、RNA或DNA/RNA杂合体。
4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其中所述样品是组织样本或来源于组织样本。
5.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其中所述样品是血液样品或来源于血液样品。
6.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其中所述样品是细胞样品或来源于细胞样品。
7.一种固定和透化细胞的样品,所述样品包含:
(A)至少一个含有靶双链核酸的固定和透化细胞;
(B)靶探针组,其中所述靶探针组包含一对靶探针,所述一对靶探针包含与靶双链核酸的第一链特异性地杂交的第一探针和与所述双链核酸的第二链特异性地杂交的第二探针;
(C)前置扩增子,所述前置扩增子包含用于所述第一靶探针的结合位点、用于所述第二靶探针的结合位点和用于扩增子的多个结合位点,其中所述前置扩增子与所述第一靶探针和所述第二靶探针杂交;
(D)多个扩增子,其中所述扩增子包含用于所述前置扩增子的结合位点和用于标记探针的多个结合位点,并且其中所述扩增子与所述前置扩增子杂交;以及
(E)多个标记探针,其中所述标记探针包含标记和用于所述扩增子的结合位点,其中所述标记探针与所述扩增子杂交;
其中所述杂交在所述靶双链核酸上提供可检测的标记。
8.如权利要求7所述的样品,其中所述靶探针组包含两对或更多对与相同靶核酸特异性地杂交的靶探针。
9.如权利要求7或8所述的样品,其中所述双链核酸是DNA、RNA或DNA/RNA杂合体。
10.如权利要求7-9中任一项所述的样品,其中所述样品是组织样本或来源于组织样本。
11.如权利要求7-9中任一项所述的样品,其中所述样品是血液样品或来源于血液样品。
12.如权利要求7-9中任一项所述的样品,其中所述样品是细胞样品或来源于细胞样品。
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