[发明专利]靶向AKT通路的神经保护性基因疗法

权利要求书

1.一种腺相关病毒(AAV)载体，所述AAV载体包括AAV衣壳，所述AAV衣壳中载体基因组经衣壳化，所述载体基因组包括AAV反向末端重复(ITR)序列、人蛋白激酶B(AKT)编码序列和引导AKT在宿主细胞中的直接表达的表达控制序列。

2.根据权利要求1所述的AAV载体，其中所述AKT编码序列包括AKT1、AKT2或AKT3编码序列。

3.根据权利要求1所述的AAV载体，其中所述AKT编码序列编码氨基酸序列SEQ ID NO:8(AKT3)、氨基酸序列SEQ ID NO:10(AKT1)或SEQ ID NO:12(AKT2)。

4.根据权利要求1到3中任一项所述的AAV载体，其中所述AKT编码序列包括与以下至少80％相同的序列：SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:13。

5.根据权利要求1到3中任一项所述的AAV载体，其中所述编码AKT的序列包括SEQ IDNO:8，并且其中所述表达控制序列包括具有CMV增强子的鸡β-肌动蛋白启动子。

6.根据权利要求5所述的AAV载体，其中所述具有CMV增强子序列的鸡β-肌动蛋白启动子是SEQ ID NO:1的nt 1443-3104或SEQ ID NO:5的nt 1493到2075。

7.根据权利要求1到6中任一项所述的AAV载体，其中所述表达控制序列包括牛生长激素(bGH)poly(A)信号序列。

8.根据权利要求1到4中任一项所述的AAV载体，其中所述AKT编码序列包括SEQ ID NO:8，并且其中所述表达控制序列包括GRK1启动子。

9.根据权利要求8所述的AAV载体，其中所述表达控制序列包括SEQ ID NO:3的nt1427-1790的GRK1启动子。

10.根据权利要求1到4中任一项所述的AAV载体，其中所述表达控制序列包括CMV/CBA启动子、GRK1启动子或hCAR启动子。

11.根据权利要求1到4中任一项所述的AAV载体，其中所述表达控制序列包括眼部细胞特异性启动子。

12.根据权利要求1到4中任一项所述的AAV载体，其中其中所述表达控制序列包括选自以下的启动子：人EF1α启动子、代谢型谷氨酸受体6(mGluR6)启动子、视紫红质启动子、视锥视蛋白启动子和转录因子启动子。

13.根据权利要求1到4中任一项所述的AAV载体，其中所述表达控制序列包括选自以下的启动子：诱导型启动子、组成型启动子和组织特异性启动子。

14.根据权利要求13所述的AAV载体，其中所述启动子是选自以下的诱导型启动子：雷帕霉素/雷帕霉素类似物(rapalog)启动子、蜕皮激素启动子、雌激素应答性启动子、四环素应答性启动子和异二聚体阻遏物开关。

15.根据权利要求1到14中任一项所述的AAV载体，其进一步包括内含子、Kozak序列、polyA序列和转录后调控元件中的一个或多个。

16.根据权利要求1到15中任一项所述的AAV载体，其中所述AAV衣壳选自AAV2、AAV5、AAV8、AAV9、AAV8bp、AAV7m8和其变体。

17.根据权利要求1到16中任一项所述的AAV载体，其中所述衣壳是AAV7m8衣壳。