[发明专利]靶向AKT通路的神经保护性基因疗法

说明书

提供了用于治疗视网膜变性的组合物和方法。在一个方面，本文提供了一种腺相关病毒(AAV)载体，所述AAV载体包括AAV衣壳，所述AAV衣壳中载体基因组经衣壳化，所述载体基因组包括AAV反向末端重复(ITR)序列、人蛋白激酶B(AKT)编码序列和引导AKT在宿主细胞中的表达的表达控制序列。

背景技术

视网膜色素变性(RP)是遗传性视网膜营养不良的总称，在全球每3000-7000个人中估计就有1人受其影响。临床发作的特征在于暗(夜)视力受损，同时伴有视杆光感受器的故障和死亡。归因于中央视网膜中视锥光感受器的变性，随着这一过程的扩张，其会破坏周边视力并最终导致完全失明。在许多情况下，这一表型是由视杆光转导、结构或内稳态所必需的基因内的无效突变引起的，这就为这一光感受器亚型的丧失提供了直接的解释。然而，这些突变通常不能解释晚期疾病中视锥细胞的逐渐恶化。

所需要的是用于有需要的受试者的RP和其它眼部病症相关视网膜变性的治疗。

发明内容

本发明通过以下实例进行说明，所述实例证明递送用于表达AKT的载体促进了光感受器数量、结构和视觉功能的显著保留。

在一个方面，一种腺相关病毒(AAV)载体，所述AAV载体包括AAV衣壳，所述AAV衣壳中衣壳化有载体基因组，所述载体基因组包括AAV反向末端重复(ITR)序列、人蛋白激酶B(AKT)编码序列和引导AKT在宿主细胞中的表达的表达控制序列。在一个实施例中，所述AKT编码序列包括AKT1、AKT2或AKT3编码序列。在一个实施例中，所述编码序列是SEQ ID NO：9。

在另一个方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包括药学上可接受的载剂和至少AAV载体，所述AAV载体包括如本文所描述的AKT序列。

在另一个方面，提供了一种用于治疗视网膜变性的方法。所述方法包含向有需要的受试者施用如本文所描述的AAV载体。在一个实施例中，所述AAV载体是在视网膜下或玻璃体内施用的。

在另一个方面，提供了一种用于产生AAV载体的质粒。在某些实施例中，所述质粒包括SEQ ID NO：1的nt 1253到5070或SEQ ID NO：3的nt 1253到3868或与其共享至少80％的同一性的序列。

在又另一方面，提供了一种产生重组AAV(rAAV)的方法。所述方法包含在存在足以允许将基因表达盒病毒基因组包装到感染性AAV包膜或衣壳中的病毒序列的情况下培养包括SEQ ID NO：1的nt 1253到5070或SEQ ID NO：3的nt 1253到3868的包装细胞。

在另一个方面，提供了一种包含载体基因组的病毒载体，所述载体基因组包括SEQID NO：1的nt 1253到5070或SEQ ID NO：3的nt 1253到3868。

在另一个方面，病毒载体包含载体基因组，所述载体基因组包括5′ITR、CMV增强子、鸡β-肌动蛋白启动子、Kozak序列、AKT编码、bGH poly A和3′ITR。

在另一个方面，病毒载体包含载体基因组，所述载体基因组包括5′ITR、GRK1启动子、SV40内含子、Kozak序列、AKT编码序列、bGH poly A和3′ITR。

在另一个方面，提供了一种用于在用于治疗视网膜变性的方法中使用的组合物，其中所述组合物包含本文所提供的AAV载体。

根据本发明的以下详细描述，本发明的仍其它方面和优点将是显而易见的。

附图说明