[发明专利]使宿主细胞产生的非分解代谢化合物的收率和生产率解偶联的方法在审
| 申请号： | 202080041659.5 | 申请日： | 2020-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN114207139A | 公开（公告）日： | 2022-03-18 |
| 发明（设计）人： | 佩内洛普·R·处;约书亚·亚当·勒曼;托马斯·乔恩·谢尔巴特;钱德雷什·塔克;安妮·恩宁·东;江汉笑 | 申请（专利权）人： | 阿迈瑞斯公司 |
| 主分类号： | C12P19/14 | 分类号： | C12P19/14;C12P19/20;C12N1/18;C12N1/20;C12N15/52;C12N15/81 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 马丛 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 宿主 细胞 产生 分解代谢 化合物 收率 生产率 解偶联 方法 | ||
1.一种使能够制造非分解代谢化合物的宿主细胞中产生的所述非分解代谢化合物的收率和生产率解偶联的方法，该方法包括降低发酵过程中的ATP利用率。
2.如权利要求1所述的方法，其中，通过添加一种或多种ATP消耗剂来降低ATP利用率。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述一种或多种ATP消耗剂是弱有机酸。
4.如权利要求3所述的方法，其中，所述弱有机酸选自山梨酸、乙酸、苯甲酸和丙酸。
5.如权利要求4所述的方法，其中，所述弱有机酸是苯甲酸。
6.如权利要求1所述的方法，其中，所述ATP利用率通过一种或多种ATP耗散酶的过表达降低。
7.如权利要求6所述的方法，其中，所述一种或多种ATP耗散酶选自酿酒酵母SSB1和ATP-二磷酸水解酶。
8.如权利要求1所述的方法，其中，通过一种或多种ATP解偶联酶的过表达来降低所述ATP利用率。
9.如权利要求8所述的方法，其中，所述一种或多种ATP解偶联酶选自NADH氧化酶(NOX)和替代氧化酶(AOX)。
10.如权利要求1所述的方法，其中，ATP水平通过所述宿主细胞中无效循环的表达降低。
11.如权利要求10所述的方法，其中，所述无效循环选自磷酸果糖激酶和果糖-1,6-二磷酸酶的同时过表达以及磷酸烯醇丙酮酸羧激酶和丙酮酸羧化酶的同时过表达。
12.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述非分解代谢化合物选自氨基酸、脂肪酸、类异戊二烯和聚酮。
13.如权利要求12所述的方法，其中，所述非分解代谢化合物是类异戊二烯。
14.如权利要求12所述的方法，其中，所述类异戊二烯选自半萜、单萜、二萜、三萜、四萜、倍半萜和多萜。
15.如权利要求12所述的方法，其中，所述类异戊二烯选自松香二烯、青蒿素前体紫穗槐二烯、蒈烯、α-法呢烯、β-法呢烯、法呢醇、牻牛儿醇、香叶基香叶醇、异戊二烯、芳樟醇、柠檬烯、月桂烯、橙花叔醇、罗勒烯、广藿香醇、β-蒎烯、桧烯、γ-萜品烯、萜品油烯和瓦伦烯。
16.如权利要求15所述的方法，其中，所述类异戊二烯是β-法呢烯。
17.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中，所述宿主细胞选自细菌细胞、植物细胞和酵母细胞。
18.如权利要求17所述的方法，其中，所述宿主细胞是酵母细胞。
19.如权利要求18所述的方法，其中，所述酵母细胞是酿酒酵母。
20.一种使能够制备类异戊二烯化合物的宿主细胞中产生的非分解代谢化合物的收率和生产率解偶联的方法，该方法包括减少所述宿主细胞中通过柠檬酸循环(TCA)的碳通量。
21.如权利要求20所述的方法，其中，通过一种或多种TCA酶的抑制来减少通过所述TCA循环的碳通量。
22.如权利要求21所述的方法，其中，所述一种或多种TCA酶的表达被下调。
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