[发明专利]使用蛋白酶控制限制酶活性有效
| 申请号： | 202080042396.X | 申请日： | 2020-10-17 |
| 公开（公告）号： | CN114207124B | 公开（公告）日： | 2023-04-14 |
| 发明（设计）人： | 朱振宇;孙大鹏;艾恩·昆比;迈克尔·肖特斯 | 申请（专利权）人： | 武汉爱博泰克生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/22 | 分类号： | C12N9/22;C12P19/34;C12Q1/37 |
| 代理公司： | 北京金智普华知识产权代理有限公司 11401 | 代理人： | 张晓博 |
| 地址： | 430078 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新二*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 使用 蛋白酶 控制 限制 活性 | ||
【权利要求书】：
1.一种控制限制性核酸内切酶活性的方法，包括将蛋白酶K、内切蛋白酶LysC和/或胰蛋白酶加入限制性核酸内切酶、缓冲液和寡聚体的反应混合物中，以抑制或阻止限制性核酸内切酶的星号活性。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，蛋白酶K、内切蛋白酶LysC和/或胰蛋白酶与限制性核酸内切酶同时加入。
3.根据权利要求1所述的方法，其中，限制性核酸内切酶是EcoRI、NcoI或BamHI。
4.根据权利要求1所述的方法，其中，寡聚体是λDNA。
5.根据权利要求1所述的方法，其中，缓冲液为：20mM Tris-HCl，pH 7.4，40mM KoAc，10mM MgCl2，0.1mM CaCl2；或20mM Tris-HCl，pH 7.5，40mM NaCl，10mM MgCl2，0.1mMCaCl2；或20mM Tris-HCl，pH 8.0，10mM MgCl2，0.1mM CaCl2。
6.根据权利要求1所述的方法，其中，限制性核酸内切酶活性通过加入终止液而终止。
7.根据权利要求1所述的方法，其中，限制性核酸内切酶活性通过加入6x终止液而终止。
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