[发明专利]具改良药物动力学的经酸碱度依赖性抗原结合活性工程化的抗人类免疫缺乏病毒抗体

说明书

本发明涉及一种在依巴珠单抗(Ibalizumab)重链的残基Y53a、D58、K96、D97、N98，或T100a处，以及在依巴珠单抗轻链的残基S26、L30、L33、Q89、Y92、S93，或Y94处具有一个或多个组氨酸突变的抗人类免疫缺乏病毒抗体。此外，本发明还涉及两个具有双组氨酸突变的变体，分别为一个在依巴珠单抗重链的残基Y53a及Y94处突变，和另一个在依巴珠单抗轻链的残基D58及L30处突变。

序列表

本申请包含一序列表，该序列表已以ASCII格式以电子方式提交，并在此全文引入作为参考。所述ASCII副本创建于2020年8月19日，名称为50538-033WO2_Sequence_Listing_08.19.20_ST25，大小为12,398字节。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年8月19日提交的美国临时申请第62/888,840号的优先权，其内容通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明总体上涉及用于人类免疫缺乏病毒(human immunodeficiency virus，HIV)预防及治疗的改良的抗人类免疫缺乏病毒抗体。本发明还通常涉及抗人类免疫缺乏病毒抗体的组氨酸突变。具体而言，本发明涉及用于人类免疫缺乏病毒预防及治疗的组氨酸突变的抗人类免疫缺乏病毒抗体。

背景技术

人类免疫缺乏病毒1型(HIV-1)进入是由病毒包膜(envelope，Env)醣蛋白gp120与T细胞受体CD4的结构域1(domain 1，D1)相互作用触发的。依巴珠单抗(Ibalizumab，iMab)为一种有效且广泛中和人类免疫缺乏病毒1型的抗体(Jacobson等人，Antimicrob.AgentsChemother.53:450-457,2009年；Kuritzkes等人，J.Infect.Dis.189:286-291,2004年)，通过主要结合于宿主T细胞上CD4受体的结构域2(domain 2，D2)来中和人类免疫缺乏病毒，进而阻止人类免疫缺乏病毒利用这些CD4受体进入T细胞并产生感染的能力(Burkly等人，J.Immunol.149:1779-178,1992年)。在最近测试的大量初代分离株(118种Env假型病毒)中，以50％抑制感染率定义，依巴珠单抗中和了92％的病毒，且以90％抑制感染率定义，依巴珠单抗中和了47.4％的病毒。尽管依巴珠单抗可有效抑制多种人类免疫缺乏病毒分离株，但仍有很大一部分的人类免疫缺乏病毒变体可逃脱依巴珠单抗的抑制活性。最近的报导指出，人类免疫缺乏病毒1型的包膜可变区5中天门冬酰胺连接的醣基化位点的丢失与对依巴珠单抗的抗药性有关(Toma等人，J.Virology 85(8):3872-2880,2011年；Pace等人，J.Acquir.Immune Defic.Syndr.Epub，2012年9月前印刷)。

抗体在其恒定区的保守位置被醣基化，且连接至该恒定区的醣基的存在及结构会影响抗体活性(参见Wright与Morrison的回顾文献，TIBTECH 15:26-32,1997年)。

据报导，在重链而非轻链中引入N-连接的醣基可提高溶解度(Pepinsky等人，Protein Sci 19,954-966,2010年；Wu等人，Protein Eng Des Sel 23,643-651,2010年)。在Pepinsky的文献中，修饰位于恒定区域而非可变区域。但是，先前的研究皆未提供将聚醣策略性地置于抗体可变区中的作用。