[发明专利]用于治疗由失调的血浆激肽释放酶介导的疾病的抗体的腺相关病毒载体递送

说明书

本公开尤其提供了一种编码抑制血浆激肽释放酶的蛋白水解活性的试剂的重组腺相关病毒(rAAV)载体。本公开还提供了一种编码抗血浆激肽释放酶抗体重链和抗血浆激肽释放酶抗体轻链的重组腺相关病毒(rAAV)载体。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年6月11日提交的U.S.S.N 62/860,101的权益和优先权，所述专利的内容整体并入本文。

背景技术

失调的血浆激肽释放酶活性可能导致促炎性和血管活性肽缓激肽(bradykinin)的过量产生。这种疾病的一实例是遗传性血管性水肿(HAE)，这是一种罕见的但可能危及生命的病症，其特征是表现为皮下和粘膜下血管性水肿的不可预测和反复发作的血管扩张。在一些情况下，HAE与低血浆C1抑制剂水平(I型)有关，而在其他情况下，蛋白质以正常或升高的量循环但功能失调(II型)。C1抑制剂是血浆激肽释放酶活性的主要调控因子。HAE发作的症状包括自然发生或由轻度创伤引发的面部、口和/或气道的肿胀。影响气道的水肿发作可能是致命的。除急性炎症发作以外，过量的血浆激肽释放酶活性也与慢性疾病相关，如自身免疫性疾病，包括红斑狼疮。

已经考虑并开发了用于治疗C1-INH缺乏或功能障碍的各种策略，包括例如抑制接触系统的成员。例如，拉那利尤单抗(lanadelumab)是已被批准用于治疗HAE的血浆激肽释放酶的完全人单克隆抗体抑制剂。

使用体内产生包括抗体的蛋白质的载体对于疾病的治疗是期望的，但是受到各种因素的限制，包括递送至受试者后不良的抗体产生。

发明内容

本发明提供了编码抗血浆激肽释放酶抗体的高效且稳健的重组腺相关病毒(rAAV)载体。本发明部分基于以下令人惊讶的发现：编码抗血浆激肽释放酶抗体重链和抗血浆激肽释放酶抗体轻链的特异性重组AAV载体导致高水平功能性抗血浆激肽释放酶抗体的体内产生。具体地讲，rAAV导致抗血浆激肽释放酶mAb在体内的稳健和持续产生，并且载体介导的抗血浆激肽释放酶抗体保留与通过传统重组表达方法(例如，CHO细胞)产生的抗体蛋白质相同的靶向活性。在本发明之前，通过施用携带所需有效负载的rAAV载体递送抗血浆激肽释放酶抗体导致未知量的活性抗体产生。因此，在本发明之前，使用编码抗血浆激肽释放酶的rAAV载体治疗C1-INH缺乏或病症，包括例如遗传性血管性水肿是不可预测的或可行的。

在一些方面，本文提供了编码全长抗体的重组腺相关病毒(rAAV)载体，所述全长抗体包含抗血浆激肽释放酶抗体重链和抗血浆激肽释放酶抗体轻链。

在一些实施方案中，抗血浆激肽释放酶抗体重链和抗血浆激肽释放酶抗体轻链经由接头连接。

在一些实施方案中，接头包含可裂解接头。

在一些实施方案中，接头包含不可裂解接头。

在一些实施方案中，抗血浆激肽释放酶抗体重链和抗血浆激肽释放酶抗体轻链由单个启动子控制。

在一些实施方案中，抗血浆激肽释放酶抗体重链和抗血浆激肽释放酶抗体轻链由单独启动子控制。

在一些实施方案中，单个启动子或一个或多个单独启动子选自遍在启动子、组织特异性启动子或可调控启动子。

在一些实施方案中，组织特异性启动子是肝特异性启动子。

在一些实施方案中，肝特异性启动子包含选自以下的启动子：人甲状腺素运载蛋白启动子(TTR)、经修饰的hTTR(hTTR mod.)、α-抗胰蛋白酶启动子、肝启动子1(LP1)、TRM启动子、人因子IX pro/肝转录因子应答寡聚物、LSP、CMV/CBA启动子(1.1kb)、CAG启动子(1.7kb)、mTTR、经修饰的mTTR、mTTR pro、mTTR增强子或碱性白蛋白启动子。

在一些实施方案中，肝特异性启动子是人甲状腺素运载蛋白启动子(TTR)。